PI3K-AKT信號(hào)通路在NDV差異性誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞凋亡中的作用.pdf

1、新城疫病毒（Newcastle Disease Virus，NDV)是一種具有較強(qiáng)復(fù)制能力并且可以特異性識(shí)別并殺傷腫瘤細(xì)胞的禽類病毒。臨床實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)新城疫病毒對(duì)人類危害很小，只有國(guó)外少數(shù)媒體報(bào)道過人類感染新城疫病毒產(chǎn)生輕度淋巴腺炎和結(jié)膜炎等癥狀，但很快就會(huì)自愈。除此之外，我們發(fā)現(xiàn)NDV除了可以感染腫瘤病毒產(chǎn)生直接殺傷效果之外，還可以通過對(duì)腫瘤細(xì)胞免疫原性的影響或者誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)從而達(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的效果。隨著科學(xué)界對(duì)溶瘤病毒治療

2、腫瘤研究的進(jìn)一步深入，NDV病毒已經(jīng)成為當(dāng)下治療腫瘤的熱門領(lǐng)域。
　　原發(fā)性肝癌是我國(guó)三大高發(fā)惡性腫瘤之一，每年約有12萬人死于肝癌。原發(fā)性肝癌的特點(diǎn)是早期難以發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)多為中晚期，治療手段主要為手術(shù)切除、肝動(dòng)脈結(jié)扎、射頻術(shù)。此外放療、化療等傳統(tǒng)療法為輔助手段，這些治療手段收到的效果均不甚理想，所以在肝癌的治療中，應(yīng)該突破傳統(tǒng)思維，這時(shí)候溶瘤病毒治療癌癥的手段也開始走進(jìn)科學(xué)家的視線。溶瘤病毒治療癌癥避免了化療對(duì)人體本身造成的傷害，

3、有效的殺傷肝癌細(xì)胞，但是這種療法的缺點(diǎn)就是對(duì)于不同基因型的同一種腫瘤細(xì)胞，NDV病毒的殺傷力也是各不相同的，這在臨床應(yīng)用的時(shí)候成為一個(gè)很大的阻礙。
　　本文通過對(duì)NDV誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞死亡的研究中，發(fā)現(xiàn)NDV病毒在感染兩種不同基因型的肝癌細(xì)胞系時(shí)PI3K/AKT信號(hào)通路活性的變化特點(diǎn)，再用廣譜AKT抑制劑Ly294002研究抑制AKT激酶活性對(duì)于NDV病毒融瘤性變化的特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)抑制肝癌細(xì)胞AKT激酶表達(dá)后，原本對(duì)NDV病毒敏感的肝癌

4、細(xì)胞系Huh7細(xì)胞變的耐受。與敏感的Huh7細(xì)胞相反的是HCC621細(xì)胞，本文使用AKT激動(dòng)劑Fumonisin B1激活A(yù)kt通路后發(fā)現(xiàn)，NDV病毒在肝癌細(xì)胞HCC621細(xì)胞中復(fù)制明顯增多，原本對(duì)NDV病毒耐受的HCC621細(xì)胞變得比較敏感。本文再通過對(duì)腫瘤細(xì)胞死亡過程中相關(guān)基因的表達(dá)研究中發(fā)現(xiàn)，在NDV病毒感染肝癌細(xì)胞的過程中，隨著感染時(shí)間變化，NDV病毒含量隨之增加，并且在早期感染中，細(xì)胞免疫應(yīng)答造成的IFN-β干擾素的水平也隨之

5、改變，這表明肝癌細(xì)胞可以通過免疫應(yīng)答產(chǎn)生干擾素來清除細(xì)胞內(nèi)的病毒，從而造成NDV病毒在早期感染中病毒復(fù)制效率較低的現(xiàn)象。本文又進(jìn)一步通過激動(dòng)劑和抑制劑改變肝癌細(xì)胞PI3K/AKT的活性后，使用NDV感染后病毒水平會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的變化，從而使得細(xì)胞耐受性增強(qiáng)或減弱，再通過分析干擾素水平變化可推測(cè)出在AKT途徑受到影響后，NDV復(fù)制水平的改變導(dǎo)致了免疫應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生的干擾素水平變化。以上結(jié)論證實(shí)AKT途徑誘導(dǎo)細(xì)胞死亡是NDV病毒誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞死亡