hWAPL基因多態(tài)性與宮頸癌發(fā)生危險性研究.pdf

1、背景及目的：
　　 宮頸癌(cervical cancer)是女性最常見的生殖道惡性腫瘤之一，在全球范圍內，每年約有20多萬女性死于宮頸癌，目前宮頸癌仍然是導致我國婦女死亡的主要原因之一，我國每年新發(fā)現131500個病例，且宮頸癌的發(fā)生率有上升和年輕化趨勢。
　　 WAPL(wing-apart like)蛋白作為一種新的調控異染色體結構的基因產物，首先在果蠅體內被證實。研究表明人體內WAPL的同源基因產物hWAPL(h

2、umanwing-apart like)蛋白是一種凝集蛋白結合蛋白，它通過與凝集蛋白的調節(jié)亞基直接相互作用，使凝集蛋白在細胞分裂初期從染色體臂及時分離。hWAPL基因在宮頸癌中呈現高表達，并且hWAPL基因表達水平與宮頸病變程度呈正相關。
　　 在人類疾病中，很多疾病是由基因變異導致的，單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotide polymorphism，SNP)是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性

3、，是人類基因組遺傳變異中最普遍的形式。其中，能代表其它位點信息的SNP位點稱為標簽SNP(tagSNP)，少數幾個tagSNP就能夠提供該區(qū)域內大多數的遺傳多態(tài)模式，從而大大提高關聯分析的有效性，即通過較少的SNP位點達到更強的統(tǒng)計學效果。
　　 目前，一些文獻都揭示了WAPL基因與宮頸癌之間存在著某種關聯性，然而關于WAPL基因上的SNP位點與宮頸癌之間的關聯性研究國內外尚未見有報道。本課題的目的是通過檢測hWAPL基因tag

4、SNP在漢族婦女宮頸癌患者的分布特點，篩查可能與宮頸癌發(fā)病相關的tagSNP位點，為進一步發(fā)現宮頸癌的發(fā)病原因及預防和治療提供線索。
　　 材料和方法：
　　 收集2008年8月至2009年10月河南省六家市級及省級醫(yī)院300例同期住院婦女的抗凝全血標本，病例組150例，血標本來自經常規(guī)病理確診的宮頸癌患者，患者采血前均未進行化療或放療，其中宮頸鱗狀細胞癌132例，宮頸腺癌18例，年齡23歲～67歲，平均年齡48歲；對照

5、組150例，血標本取自同期住院的宮頸正常的患者，其中子宮肌瘤129例，盆腔臟器脫垂21例，年齡27歲～78歲，平均年齡53歲。所有婦女均為漢族人。
　　 應用離心柱型全血基因組DNA快速提取試劑盒提取300例含0.4％EDTAK2(乙二胺四乙酸二鉀)的抗凝全血的DNA。瓊脂糖凝膠電泳(SDS-AGE)技術及凝膠成像系統(tǒng)對提取的全血DNA進行檢測和質量控制。應用基質輔助激光解吸附電離飛行時間質譜(MALDI-TOF)檢測技術對選出

6、的hWAPL基因的12個tagSNPs位點進行檢測應用。應用SPSS15.0和Haploview4.2軟件統(tǒng)計對hWAPL基因基因型、等位基因型和單體型的數據進行統(tǒng)計分析，初步篩選與宮頸癌相關的hWAPL基因的tagSNPs位點。其中，基因型與等位基因型分布頻率用x2檢驗，同時計算OR值和95％可信區(qū)間(CI)，所有檢驗均為雙側檢驗，檢驗水準α=0.05。
　　 結果：
　　 1本報告所涉及的所有SNP位點等位基因和基因

7、型的觀察值和期望值吻合良好，均符合Hardy-Weinberg平衡定律。
　　 2病例組和對照組中，hWAPL基因的SNP位點rs11595882的危險等位基因位點T(0.163:0.073，x2=11.36，P=0.001，OR=2.481)、rs10887621的危險等位基因位點C(0.880:0.820，x2=4.235，P=0.040，OR=1.610)、rs11202058的危險等位基因位點G(0.800:0.730，

8、x2=4.088，P=0.043，OR=1.479)，在病例組中的頻率明顯高于對照組。
　　 3危險型基因型與非危險型基因型頻數比較，病例組與對照組等位基因型分布統(tǒng)計結果顯示：位點rs7083506的(CC+CT)/TT等位基因型(x2=6.522，P=0.011，OR=3.273，95％CI=1.261-8.493)；rs11595882的(TT+TC)/CC等位基因型(x2=10.03，P=0.002，OR=2.510，95

9、％CI=1.406-4.482)；rs7918136的(TT+TA)/AA等位基因型(x2=6.522，P=0.011，OR=3.273，95％CI=1.261-8.493)；rs11202058的(GG+GA)/AA等位基因型(x2=6.522，P=0.011，OR=3.273，95％CI=1.261-8.493)。四個位點危險型在病例組中的分布頻率明顯高于對照組。
　　 4根據12tag SNP位點在所檢測人群中的分布得到1

10、0種單體型，其中，單體型H8(CCCCACCTGTCG)、單體型H10(CCCCATCTGTCG)在病例組中的頻率均高于對照組，且都存在顯著差異(P<0.05)。
　　 結論：
　　 1、hWAPL基因的單核苷酸多態(tài)位點rs11595882 T、rs10887621 C、rs11202058G在宮頸癌患者中的分布存在明顯差異，說明hWAPL基因遺傳多態(tài)性與漢族婦女宮頸癌的發(fā)生有關，是宮頸癌發(fā)生的易感基因之一。