高水溶性蛇葡萄素鈉鹽的制備及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、目的：研究高水溶性Amp鈉鹽的制備方法并比較Amp-Na和Amp-DMSO對人白血病K562細胞的增殖抑制作用；考察Amp-Na單用及與卡鉑合用對人肺癌SPC-A-1細胞的增殖抑制作用及其對人SPC-A-1肺癌、小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌H22皮下移植瘤的抑制作用；初步確定Amp-Na的作用機制、急性毒性及其急性毒性作用的靶器官。 方法：1.Amp分別與NaHCO3和Na2CO3按一定比例制備成Amp-Na溶液，比較二者的溶解性

2、、溶解穩(wěn)定性及pH值。 2.用MTT法考察同濃度Amp-Na與Amp-DMSO對人白血病K562細胞增殖的抑制作用，比較二者的IR和IC50；考察Amp-Na單用及與卡鉑合用對人肺癌SPC-A-1細胞的增殖抑制作用；使用流式細胞儀分析細胞周期和凋亡率。 3.用荷肉瘤S180和肝癌H22的昆明種小鼠及荷人SPC-A-1肺腺癌的裸鼠，觀察Amp-Na單用及與多種化療藥合用對小鼠肉瘤S180、小鼠肝癌H22和人SPC-A-1肺

3、腺癌的抑制作用。 4.初步評價Amp-Na對昆明種小鼠腹腔注射和靜脈注射的急性毒性，計算LD50或最大耐受量。以溶媒組為對照，觀察Amp-Na1000mg/kg靜脈注射后小鼠血清ALT濃度和肝臟指數(shù)變化，用病理組織學分級法，評價肝損傷程度。 結果：1.Amp與Na2CO3按摩爾比1∶4比例制備的Amp-Na，水溶性增強且溶解性穩(wěn)定。Amp-Na在pH=5.0磷酸鹽緩沖液中的穩(wěn)定性優(yōu)于pH=6.8的磷酸鹽緩沖液。2.相同濃

4、度的Amp-DMSO和Amp-Na對K562細胞的IR和IC50值相似，說明Amp在制備成鈉鹽后其抗腫瘤的藥理活性無明顯變化；Amp-Na單用對SPC-A-1細胞的IC50為70.7μg/ml，其作用機制是誘導細胞凋亡和形成細胞S期阻滯；Amp-Na(50-100μg/ml)與卡鉑合用對人肺癌SPC-A-1細胞的增殖具有協(xié)同抑制作用。 3.Amp-Na單獨用藥無或僅有較弱的抗腫瘤作用；Amp-Na與化療藥聯(lián)合應用具有協(xié)同抗人肺癌

5、SPC-A-1細胞和小鼠肉瘤S180皮下移植瘤的作用；但無明顯協(xié)同抗小鼠肝癌H22作用。 4.Amp-Na腹腔注射，對雄性小鼠的LD50值為688.537mg/kg，對雌性小鼠的LD50值為317mg/kg左右；Amp-Na靜脈注射，對雄性和雌性小鼠的最大耐受量均為2000mg/kg以上，肝臟為Amp-Na急性毒性作用的靶器官之一。 結論：Amp與Na2CO3按摩爾比1∶4比例制備的Amp-Na，具有水溶性強、溶解性穩(wěn)定