造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞免疫功能的研究.pdf

1、天然免疫和適應(yīng)性免疫是機(jī)體的兩大免疫系統(tǒng)，它們相輔相成，構(gòu)成機(jī)體完整的免疫防御系統(tǒng)。天然免疫細(xì)胞成分除單核細(xì)胞、粒細(xì)胞、NK細(xì)胞、γδT細(xì)胞、DC外，還有紅細(xì)胞。越來越多的研究證實(shí)紅細(xì)胞天然免疫功能的變化與許多疾病的發(fā)生、發(fā)展及病理過程有著密切的相關(guān)，如腫瘤、自身免疫性疾病、血液病等。紅細(xì)胞免疫功能的測定對臨床上疾病診斷、療效觀察、探討發(fā)病機(jī)制等方面都有重要意義。我們對造血與淋巴組織腫瘤患者的紅細(xì)胞免疫功能進(jìn)行研究，測定紅細(xì)胞CR1分子

2、的數(shù)量，檢測紅細(xì)胞CR1基因組密度多態(tài)性，并且對紅細(xì)胞天然免疫粘附功能以及對NK細(xì)胞殺傷活性的影響進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，造血與淋巴組織腫瘤患者的紅細(xì)胞CR1分子的數(shù)量、CR1基因組密度多態(tài)性、紅細(xì)胞天然免疫粘附功能及對正常NK細(xì)胞殺傷活性的影響與正常人均有顯著差異。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對造血與淋巴組織腫瘤免疫發(fā)病機(jī)制的探討、調(diào)動紅細(xì)胞和NK細(xì)胞的抗白血病作用，最終克服造血與淋巴組織腫瘤有重要的指導(dǎo)作用。 第一部分造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)

3、胞CRI分子的測定目的：檢測造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞CR1分子數(shù)量的變化，與正常人進(jìn)行對照。方法：采集靜脈血，用FITC標(biāo)記的鼠抗人CD35單抗標(biāo)記紅細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀測定了24例造血與淋巴組織腫瘤患者、21例正常人紅細(xì)胞CR1分子的數(shù)量。結(jié)果：造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞CR1分子數(shù)量平均值為80.7±13.3個(gè)/紅細(xì)胞，健康對照的紅細(xì)胞CR1分子數(shù)量平均值為105.5±8.8個(gè)/紅細(xì)胞。造血與淋巴組織腫瘤患者與健康對照相比，其

4、每個(gè)紅細(xì)胞平均CR1分子數(shù)量減少，差異有顯著意義(t=7.234,p＜0.0001)。結(jié)論：造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞CR1分子數(shù)量較正常對照顯著下降，可能是導(dǎo)致其免疫功能的下降的原因之一。 第二部分造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞CR1基因組密度多態(tài)性測定目的：測定造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞CR1基因組密度多態(tài)性與正常人的不同，探討其CR1數(shù)量下降的原因。方法：采用PCR和HindⅢ酶切技術(shù)測定25例造血與淋巴組織腫瘤患者和2

5、3例正常人紅細(xì)胞CR1密度相關(guān)基因組的多態(tài)性。結(jié)果：正常人紅細(xì)胞CR1基因組密度多態(tài)性分布情況如下：HH型18例(78％)，HL型3例(13％)，LL型2例(9％)。造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞CR1基因組密度多態(tài)性分布情況：HH型18例(60％)，HL型7例(28％)，LL型3例(12％)。對照正常人，其HH型所占比例降低，HL型所占比例升高，但差異無顯著性。結(jié)論：造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞CR1基因組密度多態(tài)性HH型比例降低、HL

6、型比例升高，但與對照相比無顯著差異。遺傳基因的變化可能引起其紅細(xì)胞CR1分子數(shù)量的改變。 第三部分造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞天然免疫粘附功能(erythrocyteinnateimmuneadheringfunction，EIIAF)檢測目的：對紅細(xì)胞天然免疫粘附功能進(jìn)行檢測，研究造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞天然免疫粘附白血病細(xì)胞的能力。方法：枸櫞酸鈉抗凝，紅細(xì)胞在自身血漿條件下對K562細(xì)胞形成免疫粘附，計(jì)算黏附率。結(jié)果：紅

7、細(xì)胞對K562細(xì)胞的免疫粘附形成了美麗的“玫瑰花”樣結(jié)合。正常人紅細(xì)胞對K562細(xì)胞的免疫粘附結(jié)合率為15.3％±6.4％(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)，造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞對K562細(xì)胞的免疫粘附結(jié)合率為7.6％±7.0％，與正常人相比顯著下降(t=3.61，p＜0.001)。結(jié)論：造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞對K562細(xì)胞的免疫黏附能力下降，與其CR1分子數(shù)量、CR1基因組密度多態(tài)性的變化一致。 第四部分造血與淋巴組織腫瘤患者紅

8、細(xì)胞對NK細(xì)胞殺傷活性的影響目的：研究造血與淋巴組織腫瘤患者紅細(xì)胞對NK細(xì)胞殺傷活性的影響，探討天然免疫細(xì)胞間的關(guān)系。方法：用MTT法測定紅細(xì)胞對正常NK細(xì)胞殺傷K562細(xì)胞活性的影響，與未加紅細(xì)胞的進(jìn)行比較。結(jié)果：正常人外周靜脈血NK細(xì)胞占PBMNC的13.8％，不加紅細(xì)胞條件下，NK細(xì)胞殺傷K562細(xì)胞活性為67％～71％。正常人紅細(xì)胞明顯增加NK細(xì)胞殺傷K562細(xì)胞活性14.7％±5.2％，造血與淋巴組織腫瘤患者的紅細(xì)胞減低NK細(xì)