含抗白粉病基因的黑麥染色體小片段向小麥的轉(zhuǎn)移.pdf

1、小麥?zhǔn)鞘澜缧缘募Z食作物，在我國(guó)僅次于水稻，是第二重要的糧食作物。小麥白粉病是嚴(yán)重影響小麥生產(chǎn)的主要病害之一。利用抗病品種是防治該病最為經(jīng)濟(jì)、有效和環(huán)保的方法。我國(guó)現(xiàn)有的小麥品種中絕大多數(shù)抗病基因被克服，喪失抗性。小麥野生近緣種蘊(yùn)藏著豐富的抗性資源，是改良小麥抗性的豐富的基因資源。黑麥?zhǔn)亲钤?、最廣用于改良小麥的近緣物種。利用近緣種有利基因的最佳途徑是創(chuàng)造攜帶目標(biāo)性狀的易位系。任正隆等提出用單體附加系作工具誘導(dǎo)小麥-黑麥染色體易位，它的優(yōu)點(diǎn)

2、是除可以穩(wěn)定地誘導(dǎo)染色體大片段易位外，還可以誘導(dǎo)染色體的小片段易位。 易位系的鑒定，尤其是小片段易位的鑒定始終是研究者面對(duì)的難題。多種鑒定技術(shù)的使用，是檢測(cè)異源染色體易位，特別是小片段易位的必要手段。本實(shí)驗(yàn)利用感白粉病的小麥純系綿陽(yáng)11和黑麥自交系R12雜交，在其單體附加系自交后代的BC1F5株系中選育小麥-黑麥異源易位系。先后采用酸性聚丙稀酰胺凝膠電泳、PCR方法、抗病性鑒定、C-帶和原位雜交技術(shù)對(duì)其中所含的黑麥外源種質(zhì)進(jìn)行鑒

3、定，結(jié)果如下： 1.隨機(jī)選取300個(gè)單體附加系的自交BC1F5株系進(jìn)行A-PAGE鑒定。其中70個(gè)株系顯示出黑麥堿特征帶。 2.根據(jù)已報(bào)道的黑麥特異重復(fù)序列pSc20H設(shè)計(jì)一對(duì)特異引物，擴(kuò)增不含黑麥堿的230個(gè)供試株系的基因組DNA，只有50個(gè)株系擴(kuò)增出了特異片斷，表明這50個(gè)株系含有黑麥染色質(zhì)成分。 3.對(duì)PCR檢測(cè)出的含有黑麥染色質(zhì)成分的50個(gè)株系進(jìn)行白粉病抗性接種鑒定。結(jié)果表明，在對(duì)照親本綿陽(yáng)11高感白粉病

4、的情況下，株系96Ⅱ691-830-98表現(xiàn)為免疫。根據(jù)系譜記載，該株系來(lái)源于小麥品種綿陽(yáng)11和黑麥自交系R12的6R染色體單體附加系后代。 4.利用染色體C-帶技術(shù)對(duì)株系96Ⅱ691-830-98進(jìn)行分析，2n=42，未發(fā)現(xiàn)黑麥特征帶，可以肯定沒有整條黑麥染色體導(dǎo)入，但不能確定有無(wú)黑麥染色體片段導(dǎo)入。 5.為弄清96Ⅱ691-830-98的遺傳背景，使用GISH技術(shù)進(jìn)一步對(duì)96Ⅱ691-830-98的染色體進(jìn)行分析。結(jié)