雙氫青蒿素對前列腺癌PC-3細胞體外生長干擾的研究.pdf

1、目的：研究雙氫青蒿素(DHA)對前列腺癌PC-3細胞的細胞毒作用以及對細胞周期和凋亡的影響，探討DHA干擾前列腺癌PC-3細胞生長的可能機制。 方法：前列腺癌PC-3細胞株分為對照組、DHA組和DHA+轉鐵蛋白(TF)組。其中對照組分為單純培養(yǎng)基HamF12、TF(25μg/ml)及0.1％二甲基亞砜(DMSO)3個組，DHA組和DHA+TF組根據(jù)DHA的濃度均分為5個小組，DHA終濃度分別為12.5，25，50，100，200

2、μmol/L，DHA+TF組中TF濃度均為25μg/ml。采用MTT法檢測各組作用24、48、72小時后，前列腺癌PC-3細胞的增殖情況；取對照HamF12組及DHA組、DHA+TF組的12.5，50，200μmol/L濃度組，作用48、72小時后分別作流式細胞儀(FCM)細胞周期、凋亡與壞死的檢測；并對其中48小時組作SP免疫組化染色，觀察前列腺癌PC-3細胞內Bcl-2、Bax、P53的表達，對結果進行圖象分析；采用掃描電鏡與透射電

3、鏡觀察DHA(0，12.5，50，200μmol/L)作用前列腺癌PC-3細胞48小時后，細胞超微結構的變化。 結果：DHA及DHA+TF對PC-3細胞的增殖抑制率與DHA濃度和作用時間相關(P<0.001)，但DHA與DHA+TF組間比較，沒有顯著差異(P>0.05)，DHA組，DHA濃度最低(12.5μmol/ml)、作用時間最短(24h)時抑制率為13.66±20.46％，DHA濃度最高(200μmol/ml)、作用時間最

4、長(72h)時，抑制率為78.40±6.79％； DHA+TF組，抑制率最高達82.64+8.31％。FCM細胞周期分析顯示DHA與DHA+TF作用PC-3細胞48小時后， G<,0>/G<,1>期細胞比率與DHA濃度呈負相關，而各濃度S期細胞比率變化相對較小，G<,2>/M期細胞比例與DHA濃度呈正相關，兩組細胞周期分布比率沒有明顯差異；與對照組比較，48，72小時，DHA與DHA+TF組PC-3細胞的凋亡率與死亡率均有增加，尤其當D

5、HA高濃度(200μmol/ml)時，增幅明顯。免疫組化顯示隨著DHA濃度的增加，DHA及DHA+TF作用48小時后， Bcl-2在PC-3細胞漿與細胞膜內的表達均降低，差異沒有統(tǒng)計學意義， Bax胞漿表達有上調趨勢，差異有統(tǒng)計學意義，而P53在對照組與DHA、DHA+TF組均呈陰性表達。PC-3 細胞經DHA作用后，電鏡下，細胞表面微絨毛減少和消失，凋亡細胞可見大小不等、呈杵狀和球狀的突起，細胞核異染色質邊集，細胞基質電子密度變深，線