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1、目的:采用表面增強(qiáng)激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI)檢測(cè)前列腺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者及骨轉(zhuǎn)移患者的血清,從中篩選出前列腺癌骨轉(zhuǎn)移血清差異性相關(guān)蛋白,為進(jìn)一步尋找前列腺癌骨轉(zhuǎn)移特異性生物蛋白標(biāo)志物提供依據(jù)。
方法:本實(shí)驗(yàn)于2006年4月至2009年10月在山西省腫瘤醫(yī)院和
2、山西省腫瘤研究所實(shí)驗(yàn)室完成。應(yīng)用美國(guó)CipherGen公司CM10芯片和蛋白芯片儀檢測(cè)所收集的19例前列腺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者及35例前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清中的蛋白質(zhì)。設(shè)定所有血清樣本檢測(cè)的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量區(qū)問(wèn)在2000Da~20000Da。利用PBSⅡ-C型蛋白質(zhì)芯片閱讀儀對(duì)CM10芯片進(jìn)行檢測(cè),所得到的蛋白質(zhì)以波譜的形式表示。采用Biomarker Wizard軟件對(duì)2組血清在相同質(zhì)荷比的蛋白質(zhì)含量數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,將分析所得到的含量有
3、顯著性差異(P<0.05)的蛋白質(zhì)建立數(shù)據(jù)庫(kù),導(dǎo)入BiomarkerPattern智能統(tǒng)計(jì)分析軟件,選擇相應(yīng)條件,對(duì)其進(jìn)行分組統(tǒng)計(jì),從而得到能夠正確分組的前列腺癌骨轉(zhuǎn)移血清差異性相關(guān)蛋白。
結(jié)果:
①19例前列腺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者與35例前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的血清蛋白質(zhì)在質(zhì)荷比為2000Da~20000Da間有6個(gè)蛋白質(zhì)含量有顯著差異。
②前列腺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移組在質(zhì)荷比為2089Da、4281Da、350
4、7Da、4178Da處的蛋白質(zhì)的相對(duì)含量明顯高于前列腺癌骨轉(zhuǎn)移組分別為[(4.63±8.03,9.88±10.77)、(19.78±21.46,26.73±19.41)、(5.46±10.14,8.10±8.74)、(38.01±26.27,45.25±20.40),P≤0.05]。
③前列腺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移組在質(zhì)荷比為15900Da、16081Da處的蛋白質(zhì)的相對(duì)含量明顯低于前列腺癌骨轉(zhuǎn)移組分別為[11.52±16.80,4.
5、84±5.83)、(8.55±12.64,3.56±3.90),P≤0.05]。
結(jié)論:本次試驗(yàn)研究宗旨是通過(guò)患者血清中蛋白質(zhì)譜的差別來(lái)分析可用于前列腺癌骨轉(zhuǎn)移診斷的血清差異性蛋白。應(yīng)用表面增強(qiáng)激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)分析前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清中蛋白質(zhì)譜的變化,以及對(duì)照無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者的蛋白質(zhì)譜,通過(guò)蛋白芯片儀發(fā)現(xiàn)的差異性相關(guān)蛋白。此次共篩選出162組差異性蛋白,但只有6組蛋白的有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中骨轉(zhuǎn)移組中
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