多巴胺生物傳感針的研制及應(yīng)用.pdf

1、神經(jīng)遞質(zhì)是哺乳動(dòng)物和人類(lèi)中樞神經(jīng)重要的信息傳遞物質(zhì)，多巴胺作為一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)參與許多生理活動(dòng)。本文研制的生物傳感器可在體監(jiān)測(cè)給藥后大鼠尾核中多巴胺濃度的變化，這對(duì)多巴胺的體內(nèi)藥物分析及與其代謝異常有關(guān)的疾病的診斷和治療具有非常重要的意義。本文采用麥芽糊精修飾和靜電自組裝兩種方法制作多巴胺生物傳感針，并對(duì)傳感器性能、制作工藝以及在體測(cè)量等方面進(jìn)行了研究。 1.麥芽糊精修飾的多巴胺生物傳感針的研制及應(yīng)用。 取鉑絲固定于玻

2、璃毛細(xì)管內(nèi)，外套不銹鋼管作為基體針。以酪氨酸酶為敏感物質(zhì)，殼聚糖為載體，麥芽糊精（maltodextrin，MD）為激活劑，Nafion為抗干擾物質(zhì)，制備麥芽糊精修飾的多巴胺生物傳感針。采用單因素試驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)確定修飾條件為：在1.5％殼聚糖溶液中浸涂?jī)纱瘟栏沙奢d體膜，吸附5h，交聯(lián)4h，戊二醛濃度0.25％，給酶量0.15mg/ml，麥芽糊精10?l，固定溫度4℃，在1％Nafion溶液中浸涂?jī)纱?，每?2s。 傳感針性能測(cè)定

3、結(jié)果表明，傳感針適用pH7.2～7.6，適用溫度37℃，響應(yīng)時(shí)間4min，線性范圍：5×10-7 mol/L～5×10-4mol/L，最低檢測(cè)限：5×10-7mol/L。4℃濕法保存下可連續(xù)使用6d，Na+，K+，Ca2+，NH4+等離子及抗壞血酸對(duì)測(cè)定基本無(wú)影響，重現(xiàn)性RSD＜4.5％。以研制的多巴胺傳感器對(duì)大鼠腦組織尾核進(jìn)行在體測(cè)定，結(jié)果表明，給予不同劑量的美多芭，傳感器的響應(yīng)時(shí)間均為10min左右，響應(yīng)信號(hào)隨給藥劑量增大而增大，另

4、外，在給予相同劑量美多芭的同時(shí)添加司來(lái)吉蘭后，傳感針的響應(yīng)更大，并隨司來(lái)吉蘭的給藥劑量增大而增大。達(dá)峰時(shí)間均為40min左右。 2.靜電自組裝技術(shù)制備多巴胺生物傳感針的研究及應(yīng)用。 以氧分壓傳感針為基體，殼聚糖為聚陽(yáng)離子，酪氨酸酶為聚陰離子，Nafion為抗干擾物質(zhì)，采用靜電自組裝技術(shù)制備多巴胺生物傳感針。通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)確定酶固定條件為：酶緩沖液pH7.0，殼聚糖濃度1.0％，給酶量0.15mg/ml，自組裝1

5、0次，自組裝溫度4℃，在1％Nafion溶液中浸涂?jī)纱?，每?0s。 傳感針性能測(cè)定結(jié)果表明，傳感針適用pH7.2～7.8，適用溫度37℃，響應(yīng)時(shí)間3min，線性范圍：5×10-7 mol/L～5×10-4mol/L，最低檢測(cè)限：1×10-7mol/L。4℃濕法保存下可連續(xù)使用10d，選擇性良好，重現(xiàn)性RSD＜5％。在體檢測(cè)結(jié)果表明，腹腔注射低、中、高三種劑量鹽酸司來(lái)吉蘭后，尾核中多巴胺濃度的變化趨勢(shì)顯示代謝過(guò)程與藥物劑量間存在