DNA酶Ⅰ、載脂蛋白E基因多態(tài)性與血脂水平和冠心病的關(guān)系研究.pdf

1、冠心病(CAD)是嚴(yán)重威脅人類健康的主要疾病之一，流行病學(xué)調(diào)查及死因分析結(jié)果均顯示在今后的20多年中，CAD的發(fā)病及死亡在全世界范圍內(nèi)仍呈上升趨勢。現(xiàn)階段，冠心病病因研究主要集中在兩個方面：一、繼續(xù)從宏觀水平尋找危險因素如環(huán)境因素的作用等。二、從分子生物學(xué)水平探討CAD發(fā)病的遺傳易感機理。隨著分子生物學(xué)理論及技術(shù)的發(fā)展，CAD基因機制研究也越來越受到重視，CAD是一種復(fù)雜的多基因遺傳病這一觀點也日益為人們所接受。研究表明冠心病相關(guān)基因涉

2、及到止血系統(tǒng)(包括凝血、纖凝等)、糖類及臘代謝的調(diào)節(jié)系統(tǒng)、炎癥反應(yīng)系統(tǒng)、血壓調(diào)節(jié)系統(tǒng)、機體的損失修復(fù)系統(tǒng)等。2006年，KumamotoT首次提出DNA酶ⅠG2317等位基因是日本人心肌梗塞的獨立危險因素。DNA酶Ⅰ存在蛋白及基因水平的多態(tài)性，其基因多態(tài)性主要包括8外顯子A2317G單核苷酸多態(tài)及4內(nèi)含子可變串聯(lián)重復(fù)序列。目前，關(guān)于中國漢族人群DNA酶Ⅰ基因多態(tài)性的分布特點及多態(tài)性與冠心病的關(guān)系尚無報道。本研究通過檢測正常中國部分漢族人

3、群DNA酶Ⅰ基因型，總結(jié)其多態(tài)性分布特征；分析DNA酶Ⅰ基因多態(tài)性冠心病易感性的關(guān)系；同時，對DNA酶Ⅰ與載脂蛋白E基因多態(tài)性進行關(guān)聯(lián)分析。 第一部分：中國部分漢族人群DNA酶Ⅰ基因多態(tài)性的特點及與血脂、血糖相關(guān)性研究 目的：對中國部分漢族人群DNA酶Ⅰ進行基因分型，計算各種基因型的分布頻率并進行單體型分析，總結(jié)基因多態(tài)性分布特點，分析各基因型、雙倍型與血糖、血脂的關(guān)系。 方法：入選來自上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)

4、院體檢中心的體檢者402名，均經(jīng)相關(guān)檢查排除高血壓、糖尿病、冠心病、高脂血癥。應(yīng)用PCR及PCR-限制性片段長度多態(tài)(PCR-RFLP)技術(shù)，分析DNA酶Ⅰ基因8外顯子單核苷酸多態(tài)位點A2317G及4內(nèi)含子56bp可變串聯(lián)重復(fù)序列(HumDN1)的多態(tài)性；SHEsis統(tǒng)計軟件進行單體型分析；協(xié)方差分析基因型間血糖、血脂水平差異。 結(jié)果：在402例研究對象中共檢測到3種A2317G基因型及9種HumDN1基因型，其主要等位基因分別

5、為A2317(分布頻率為53％)、HumDN1*3(分布頻率為48％)。同時，A2317G及HumDN1多態(tài)性呈連鎖不平衡，其連鎖不平衡系數(shù)D'=0.717。DNA酶Ⅰ單體型A-3分布比例最高，所占頻率為46.5％。DNA酶Ⅰ各基因型及雙倍型間空腹血糖、甘油三酯、總膽固醇、高、低密度脂蛋白膽固醇水平無明顯統(tǒng)計學(xué)差異，所有P值均＞0.05。 結(jié)論：與其他種族相比，中國漢族人群DNA酶Ⅰ基因多態(tài)性具有獨特的分布特征，其多態(tài)性與空腹血

6、糖、血脂水平無關(guān)。 第二部分：中國部分漢族人群DNA酶Ⅰ基因多態(tài)性與冠心病的相關(guān)性研究 第一章：中國部分漢族人群DNA酶Ⅰ基因型及單體型與急性心肌梗塞的相關(guān)性研究 目的：探討DNA酶Ⅰ與中國部分漢族人群急性心肌梗塞(acutemyocardialinfarction，AMI)易感性的關(guān)系。 方法：以278例AMI患者作為病例組，排除冠心病的體檢者297例為對照組，PCR及PCR-限制性片段長度多態(tài)(PCR

7、-RFLP)技術(shù)，分析DNA酶ⅠA2317G及4內(nèi)含子56bp可變串聯(lián)重復(fù)序列(HumDN1)基因型；SHEsis統(tǒng)計軟件進行單體型分析；將年齡、性別、高血壓、糖尿病及吸煙作為協(xié)變量，應(yīng)用協(xié)方差分析A2317G、HumDN1各基因型間血脂水平的差異：X2檢驗分析AMI患者冠脈血管病變支數(shù)與基因型的關(guān)系。 結(jié)果：在AMI患者中檢測到一種新的未報道過的HumDN1基因型即HumDN14/6，但AMⅠ組及對照組A2317G、HumDN

8、1各基因型和等位基因分布差異無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，兩組DNA酶Ⅰ單體型分布亦無差異。DNA酶Ⅰ各基因型冠脈血管病變支數(shù)無明顯差異。HumDN1基因型間總膽固醇水平有明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.02)，而各基因型間血清甘油三酯、高、低密度脂蛋白膽固醇、載脂蛋白AI、B、E及脂蛋白(a)水平無明顯統(tǒng)計學(xué)差異，所有P值均＞0.05。 結(jié)論：DNA酶Ⅰ基因可能不是中國漢族人群急性心肌梗塞易感基因，DNA酶ⅠHumDN1基因型與急

9、性心肌梗塞患者血清總膽固醇水平相關(guān)。 第二章：中國部分漢族人群DNA酶Ⅰ基因型及單體型與不穩(wěn)定心絞痛的相關(guān)性研究 目的：探討DNA酶I基因多態(tài)性與漢族人群不穩(wěn)定心絞痛(unstableangiapectoris，UAP)易感性的關(guān)系。 方法：以196例UAP患者為病例組，排除冠心病的297例體檢者為對照組，PCR及PCR.限制性片段長度多態(tài)(PCR-RFLP)分析DNA酶Ⅰ基因A2317G及HumDN1多態(tài)性；協(xié)

10、方差分析A2317G、HumDN1各基因型與血脂的關(guān)系，將年齡、性別、高血壓、糖尿病及吸煙作為協(xié)變量；X2檢驗分析UAP患者冠脈血管病變支數(shù)與基因型的關(guān)系。 結(jié)果：UAP組與對照組A2317G、HumDN1各基因型及等位基因分布無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，兩組DNA酶Ⅰ單體型分布亦無差異。不穩(wěn)定心絞痛患者DNA酶Ⅰ各基因型冠脈血管病變支數(shù)、血脂水平的差異無明顯統(tǒng)計學(xué)意義，所有P值均＞0.05。 結(jié)論：DNA酶Ⅰ基因

11、多態(tài)性與中國漢族人群不穩(wěn)定心絞痛及其血脂水平無明顯相關(guān)性。 第三部分：DNA酶Ⅰ及載脂蛋白E基因多態(tài)性與中國部分漢族人群冠心病的相關(guān)研究 目的：探討載脂蛋白E基因多態(tài)性與部分漢族人群冠心病及血脂水平的相關(guān)性，分析DNA酶Ⅰ與載脂蛋白E基因多態(tài)性的關(guān)聯(lián)關(guān)系。 方法：以474例冠心病患者(包括278例AMI及196例UAP患者)作為病例組，297例體檢者為對照組，應(yīng)用擴增阻滯突變系統(tǒng)(ARMS)檢測載脂蛋白E基因型；

12、協(xié)方差分析基因型與血脂的關(guān)系；X2檢驗分析DNA酶Ⅰ與載脂蛋白E基因多態(tài)的關(guān)聯(lián)性。 結(jié)果：冠心病組載脂蛋白E3/3基因型分布頻率明顯低于對照組，E3/4基因型頻率明顯高于對照組(P＜0.05)：冠心病組ε3等位基因頻率低于對照組，ε4等位基因頻率明顯高于對照組(P＜0.05)。冠心病組基因型E4/X的TC、LDL-C、載脂蛋白B明顯高于E3/3和E2/X組，E3/3的TC、LDL-C、載脂蛋白B水平也顯著高于E2/X(P＜0.0