水稻高效表達(dá)啟動(dòng)子的分離及表達(dá)分析和重金屬離子鋅和鐵污染的土壤植物修復(fù)研究.pdf

1、真核生物基因表達(dá)調(diào)控是分子生物學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。植物基因的表達(dá)受啟動(dòng)子的控制，高效表達(dá)啟動(dòng)子的分離及功能分析不僅是植物基因工程研究的重要方面，也是表達(dá)調(diào)控研究的重要內(nèi)容。 本文根據(jù)EST數(shù)據(jù)克隆了一個(gè)預(yù)測(cè)在水稻莖中高效表達(dá)的啟動(dòng)子Os252和兩個(gè)預(yù)測(cè)在水稻胚乳中高效表達(dá)的啟動(dòng)子Os772及Os359。將這三個(gè)啟動(dòng)子與GUS基因構(gòu)建成表達(dá)載體。然后采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化水稻粳稻品種日本晴(O．sativa japonica)，分析這

2、些啟動(dòng)子的組織特異性以及啟動(dòng)基因表達(dá)強(qiáng)度。 轉(zhuǎn)基因水稻GUS染色及PCR鑒定結(jié)果表明，GUS基因已經(jīng)成功地整合進(jìn)水稻基因組中。GUS組織化學(xué)分析表明，Os252能啟動(dòng)GUS基因在水稻葉、莖以及胚乳中表達(dá)，而Os772和Os359能啟動(dòng)GUS基因在水稻胚乳中表達(dá)但不能在葉子和莖中表達(dá)。進(jìn)一步GUS酶活性的測(cè)定表明，葉和胚乳中Os252啟動(dòng)子活性分別是35S啟動(dòng)子的1.9和2.5倍，而Os772和Os359啟動(dòng)子在各組織中的酶活性相