β-細(xì)辛醚對(duì)體外培養(yǎng)心肌細(xì)胞缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、石菖蒲為天南星科植物石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott．)的根莖，是中藥中為數(shù)不多的芳香開竅藥之一。石菖蒲根莖和葉均含揮發(fā)油(0.11～0.42％)，油中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)34種成分，其主要成分為β-細(xì)辛醚(63.2％～81.2％)，α-細(xì)辛醚(3.4％～13.7％)。臨床廣泛用于昏迷、癲癇、癲狂、冠心病、心絞痛、心率失常等疑難雜癥，為心腦血管系統(tǒng)的常用藥?，F(xiàn)代藥理研究也表明，石菖蒲對(duì)心血管系統(tǒng)有抗心律失常、抑制血小板凝聚

2、、舒張血管、改善供血、降脂等作用。近年來，本實(shí)驗(yàn)室成功從石菖蒲揮發(fā)油中提取到純度高達(dá)99.44％的有效單體β-細(xì)辛醚，并對(duì)其進(jìn)行了一系列心腦血管方面的研究。結(jié)果表明，β-細(xì)辛醚能降低動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂；改善高粘血癥大鼠的血液流變性；減輕缺血心肌的壞死程度。由此可見，β-細(xì)辛醚對(duì)心血管系統(tǒng)有明顯的保護(hù)作用，提示其可能對(duì)臨床心血管病具有良好的治療效果。 研究目的：采用連二亞硫酸鈉(Na<,2>S<,2>O<,4>)建立體外培養(yǎng)的乳

3、鼠心肌細(xì)胞缺血/再灌注損傷模型，觀察β-細(xì)辛醚對(duì)缺血/再灌注損傷心肌細(xì)胞的保護(hù)作用，并初步探討其作用機(jī)制。 研究方法：利用培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞，采用Na<,2>S<,2>O<,4>建立心肌細(xì)胞缺血/再灌注損傷模型。實(shí)驗(yàn)分六組：正常對(duì)照組、模型組、β-細(xì)辛醚高劑量組(25μg/ml)、β-細(xì)辛醚中劑量組(12.5μg/ml)、β-細(xì)辛醚低劑量組(6.25μg/ml)、基質(zhì)組。MTT法測(cè)定細(xì)胞存活率，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)線粒體膜電位

4、(MMP)，并測(cè)定其細(xì)胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的活力，從而觀察β-細(xì)辛醚對(duì)心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。 研究結(jié)果：與正常組相比，模型組細(xì)胞存活率、MMP明顯降低(P≤0.05)，培養(yǎng)液中LDH、CK含量明顯升高(P≤0.05)，說明模型組細(xì)胞損傷嚴(yán)重，成功建立了心肌細(xì)胞缺血/再灌注損傷模型。與模型組相比，β-細(xì)辛醚能顯著提高缺血/再灌注損傷心肌細(xì)胞的細(xì)胞存活率、MMP(P≤0.05)，明顯降低培養(yǎng)液中LDH、CK

5、含量(P≤0.05)，其中β-細(xì)辛醚中劑量(終濃度為12.5μg/ml)對(duì)缺血/再灌注損傷心肌細(xì)胞的保護(hù)作用比較大。 研究結(jié)論：β-細(xì)辛醚能顯著提高缺血/再灌注心肌細(xì)胞的細(xì)胞存活率、MMP，明顯降低培養(yǎng)液中LDH、CK含量，說明β-細(xì)辛醚對(duì)缺血/再灌注損傷心肌細(xì)胞具有顯著的保護(hù)作用。β-細(xì)辛醚高、中、低劑量組(終濃度為25μg/ml，12.5μg/ml,6.25μg/ml)之間不存在量效關(guān)系，其中β-細(xì)辛醚中劑量對(duì)缺血/再灌注損