Tau基因5′不翻譯區(qū)、3′不翻譯區(qū)、內(nèi)含子基因多態(tài)性與家族性肌萎縮側(cè)索硬化發(fā)病的研究.pdf

1、目的： 分析正常人群、家族性肌萎縮側(cè)索硬化患者的Tau基因5’不翻譯區(qū)、3'不翻譯區(qū)、內(nèi)含子基因多態(tài)性，結(jié)合臨床資料，初步獲得Tau基因5'不翻譯區(qū)、3'不翻譯區(qū)、內(nèi)含子基因多態(tài)性與家族性肌萎縮側(cè)索硬化發(fā)病的關(guān)系，探索家族性肌萎縮側(cè)索硬化發(fā)病的可能機制，為前瞻性診斷、防治及判斷肌萎縮側(cè)索硬化預(yù)后的研究提供新的理論基礎(chǔ)和思路。 方法： 收集正常中國漢族人40例、家族性肌萎縮側(cè)索硬化患者及其家系成員25例的臨床資料（

2、包括遺傳家系譜）和靜脈血。提取外周血DNA，利用PCR擴增DNA中Tau基因5’不翻譯區(qū)、3’不翻譯區(qū)、內(nèi)含子目的片段，采用熒光標(biāo)記法測序分析Tau基因5’不翻譯區(qū)、3’不翻譯區(qū)、內(nèi)含子的基因多態(tài)性位點，用DNAman、Chromas軟件進(jìn)行對比分析，用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，對數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗及Fisher確切概率法統(tǒng)計分析。 結(jié)果： 1、臨床資料數(shù)據(jù)：該家系中受累患者的臨床表型存在不同，主要表現(xiàn)在病情進(jìn)展、起病年齡

3、、首發(fā)癥狀及存活時間等不一致，可分為兩組：（1）進(jìn)展迅速組：家系中Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅲ1、Ⅲ2、Ⅲ3病情進(jìn)展迅速，發(fā)病后18個月內(nèi)就出現(xiàn)了呼吸衰竭。平均存活時間為10.2個月，從3個月至24個月不等。平均發(fā)病年齡為36.6歲。他們大部分以肢體乏力起病，在該組中，所有患者均以肢體受累發(fā)病，無1例以延髓受累發(fā)病。（2）進(jìn)展緩慢組：家系中Ⅱ3病情進(jìn)展緩慢，于更長時間才出現(xiàn)延髓肌受累，進(jìn)而出現(xiàn)呼吸衰竭。該先證者以肢體乏力起病，先出現(xiàn)下運動神經(jīng)元損害特

4、征，癥狀出現(xiàn)后第3年才開始出現(xiàn)吞咽困難、聲音嘶啞等延髓肌受累現(xiàn)象，第4年開始有呼吸困難癥狀，但至今仍存活。發(fā)病年齡為60歲，與進(jìn)展迅速組相比，發(fā)病年齡更晚，存活時間更長。 2、本實驗中FALS家系譜具有以下特點：1、本家系前3代連續(xù)均有患者，每一個患者均有一個患病的父母；2、雙親未患病，子女不發(fā)病；3、存在男到男，男到女的遺傳方式，男：女比例是1：1，遺傳與性別無關(guān)：4、第四代中尚未出現(xiàn)患者。 3、測序比對后發(fā)現(xiàn)：Tau

5、基因的5’不翻譯區(qū)、3’不翻譯區(qū)、內(nèi)含子基因中存在18個多態(tài)性位點（分別為135451C>G、135504C>G、135554T>G、136491G>T、138278A>G、138300A>G、138320A>G、138325C>G、138344A>G、138380T>G、138417A>G、138418T>G、102922C>T、105646G>A、105655T>G、105697T>G、107780G>A、123972-123973

6、TC>AA或AC），各位點變異情況在FALS組的出現(xiàn)率均高于正常對照組，但其中只有3個位點：即105697T>G、138278A>G、138417A>G，在兩組中出現(xiàn)率的差別有統(tǒng)計學(xué)意義P<0.05（其中105697T>G、138417A>G兩位點采用Fisher's精確概率法：P值分別為0.005、0.032；138278A>G位點采用卡方檢驗：X2值=8.829，p=0.003）。余位點的變異率在兩組中均無顯著差別，無統(tǒng)計學(xué)意義。

7、 4、Tau基因的5'不翻譯區(qū)、3’不翻譯區(qū)、內(nèi)含子多態(tài)性位點分布特點：主要聚集于內(nèi)含子9、10與3’不翻譯區(qū)，大部分（75[56％]）分布在內(nèi)含子9和10當(dāng)中，3’不翻譯區(qū)至今已發(fā)現(xiàn)22個多態(tài)性位點。此次新發(fā)現(xiàn)的3個位點變異均為單核苷酸多態(tài)性（SNP）。 5、出現(xiàn)3個有意義多態(tài)性位點（即105697T>G、138278A>G、138417A>G）的家系樣本中，多為家系中第Ⅲ、Ⅳ代親屬，隨訪中均未有發(fā)病或其它癥狀；家系中的

8、患者未發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)上述3個多態(tài)性位點變異。 結(jié)論： 1、我們發(fā)現(xiàn)該家系基本符合常染色體顯性遺傳疾病的家系特點。該家系受累患者的臨床表型不一致，可分為兩種不同的類型：（1）進(jìn)行性肌無力迅速進(jìn)展，于18個月內(nèi)出現(xiàn)延髓肌受累，呼吸衰竭而死亡；（2）進(jìn)行性肌無力緩慢進(jìn)展，于更長時間才出現(xiàn)延髓肌受累，出現(xiàn)呼吸衰竭。 2、Tau基因的3’不翻譯區(qū)、內(nèi)含子9、10、11中分布的18個多態(tài)性位點中：其中3個多態(tài)性位點出現(xiàn)在FALS組