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文檔簡介
1、背景與目的:沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis,C.t)是性傳播疾病的常見病原體之一,嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生,D~K血清型侵犯泌尿生殖道粘膜的柱狀上皮,初期的下生殖道衣原體感染常表現(xiàn)為宮頸炎或尿道炎,若不及時(shí)用抗生素治療,可發(fā)生上行感染,導(dǎo)致前列腺炎、附睪炎、盆腔炎、異位妊娠和不孕不育癥。治療感染的主要藥物是抗菌藥,但由于C.t細(xì)胞內(nèi)寄生,藥物須穿過細(xì)胞膜才能對(duì)C.t起作用,使C.t的清除比較困難,甚至形成持續(xù)感染狀態(tài),造成
2、感染長期不愈。阿奇霉素作為一種蛋白合成抑制物,是治療C.t感染的一線藥物,對(duì)處于代謝活躍狀態(tài)的始體,不論是胞內(nèi)始體還是純化后的無宿主的始體,阿奇霉素都可以迅速抑制其蛋白的合成。
為了了解阿奇霉素對(duì)胞內(nèi)C.t作用后引起的C.t結(jié)構(gòu)變化,我們通過對(duì)C.t標(biāo)準(zhǔn)株體外培養(yǎng)初期添加不同濃度的阿奇霉素和培養(yǎng)成熟后加入一定濃度的阿奇霉素,再觀察宿主細(xì)胞和C.t超微結(jié)構(gòu)的變化,以期從超微結(jié)構(gòu)層面進(jìn)一步闡明藥物的作用機(jī)制。以及初步探討阿奇霉
3、素誘導(dǎo)持續(xù)感染狀態(tài)的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)。
材料與方法:
本實(shí)驗(yàn)采用細(xì)胞培養(yǎng)法對(duì)沙眼衣原體標(biāo)準(zhǔn)株(D/UW-3/Cx)進(jìn)行體外培養(yǎng),在C.t體外培養(yǎng)過程中添加不同濃度的阿奇霉素和培養(yǎng)成熟后加入一定濃度的阿奇霉素,再在透射電鏡下觀察宿主細(xì)胞和C.t超微結(jié)構(gòu)的變化。
結(jié)果:
在接種時(shí)加入不同濃度的阿奇霉素培養(yǎng)48小時(shí)后,光鏡下觀察可見C.t包涵體較對(duì)照變小,數(shù)目減少,隨阿奇霉素濃度的增加這種情
4、況更加明顯。透射電鏡下可見包涵體內(nèi)外囊泡增多,囊泡的大小形態(tài)各異;異常增大的始體,部分存在分裂異常;原體數(shù)目減少,體積增大,分裂異常,外膜皺褶增多;隨著阿奇霉素的濃度的增加,可出現(xiàn)“破碎”的包涵體,異常增大的原體,始體壞死崩解。阿奇霉素濃度為0.333 mg/1時(shí)不能見到包涵體。
培養(yǎng)48小時(shí)后加入0.134mg/1阿奇霉素,初期可見包涵體內(nèi)糖原顆粒增多;隨作用時(shí)間的延長出現(xiàn)C.t的外膜增大,形成囊泡及囊泡脫落;出現(xiàn)囊泡外
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