厄貝沙坦對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠早期腎臟肥大的影響及其機(jī)制探討.pdf

1、目的:腎臟肥大是糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)早期特征性病理改變,與后期的腎臟纖維化密切相關(guān).腎臟局部腎素—血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system,RAS)的異常在DN發(fā)生發(fā)展中具有重要作用,但是其確切機(jī)制仍不明了.結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connective tissue growthfactor,CTGF)是新近發(fā)現(xiàn)的一個(gè)重要的致纖維化因子,CTGF是否參與了糖尿病早期腎臟肥大?其可

2、能的機(jī)制又是什么?有關(guān)這方面的報(bào)道很少.本研究旨在探討血管緊張素Ⅱ受體1拮抗劑(angiotensinⅡ type 1 receptor antagonist,ARA)厄貝沙坦(irbesartan,Irb)對(duì)鏈脲佐菌素(streptozotosin,STZ)誘導(dǎo)的單側(cè)腎切除大鼠早期尿蛋白排泄、小球面積、體積和小管面積、腎小球毛細(xì)血管基底膜(glomerular basement membrane,GBM)、腎小管基底膜(tubular

3、 basement membrane,TBM)的改變,以及腎臟CTGF、p27kip1和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)表達(dá)的影響,以探討厄貝沙坦腎保護(hù)作用機(jī)制.方法:將體重為180±20g的清潔級(jí)雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為對(duì)照(假手術(shù))組(C組)(n=32)、糖尿病腎病(DN)組(n=35)和糖尿病血管緊張素Ⅱ受體1拮抗劑Irb治療(DNI)組(50mg/kg/d)(n=39).每組再隨機(jī)分為4個(gè)亞組:1周,

4、2周,4周和 8周組,分別于糖尿病成模后1周,2周,4 周和8周處死.大鼠單側(cè)腎切除(右腎)1周后一次性腹腔注射STZ(50mg/Kg)誘導(dǎo)糖尿病模型,觀察每周血糖(BG),24小時(shí)尿量(UV),體重(BW)及處死前的24小時(shí)尿蛋白定量(24Upro),尿白蛋白排泄(24Ualb),內(nèi)生肌苷清除率(Ccr),腎重(KW),腎重/體重(KW/BW)等腎臟肥大指標(biāo)的改變,應(yīng)用RY-2000計(jì)算機(jī)輔助圖像分析軟件(CMIAS)測(cè)定腎小球毛細(xì)血

5、管袢面積(A<,G>)、體積(V<,G>),近端小管面積(A<,T>),電鏡觀察8周組大鼠的GBM和TBM 厚度的改變,免疫組織化學(xué)方法(采用SP法)觀察腎皮質(zhì)CTGF、p27kip1、α-SMA表達(dá)的改變,免疫組化雙染觀察CTGF和α-SMA在腎臟皮質(zhì)共表達(dá)的情況.并分別對(duì)CTGF的表達(dá)利p27kip1的表達(dá)、A<,G>、V<,G>、A<,T>、24Upro、、24Ualb作相關(guān)分析.結(jié)論:在糖尿病早期,升高的CTGF可能介導(dǎo)了早期腎