溫州盤菜離體培養(yǎng)及其過程中生理生化研究.pdf

1、溫州盤菜是浙江省溫州地區(qū)地方特色蔬菜品種，營(yíng)養(yǎng)豐富，藥用價(jià)值高，深受消費(fèi)者的喜愛。近年來由于植物病毒侵染，嚴(yán)重影響其質(zhì)量和產(chǎn)量。利用生物學(xué)技術(shù)手段培育出抗病品種是目前的迫切需要，這一目的成功實(shí)現(xiàn)要以盤菜離體培養(yǎng)植株再生體系建立為前提，本文以溫州盤菜子葉-子葉柄(帶柄子葉)為外植體，通過對(duì)其離體培養(yǎng)植株再生的影響因素以及其在此過程中的生理生化變化規(guī)律進(jìn)行研究。結(jié)果如下： 1.溫州盤菜離體培養(yǎng)植株再生體系的建立1.1硝酸銀在2-8m

2、g·L-1濃度范圍內(nèi)，有助于提高其不定芽的再生率，溫州盤菜離體培養(yǎng)最佳濃度是6mg·L-1。 1.2無菌苗的苗齡是影響盤菜不定芽再生的重要因素之一，5-6d苗齡的外植體最適于盤菜不定芽再生。 1.3瓊脂可以改變培養(yǎng)基的微環(huán)境，提高瓊脂濃度對(duì)盤菜不定芽再生有抑制作用，當(dāng)瓊脂濃度提高到10g·L-1時(shí)，不定芽再生率只有3％，當(dāng)其濃度達(dá)12g·L-1時(shí)，沒有不定芽的再生。 1.4激素是影響不定芽再生最重要的因素，對(duì)于溫

3、州盤菜離體培養(yǎng)分裂素6-BA優(yōu)于KT、ABA。生長(zhǎng)素2,4-D和NAA對(duì)于盤菜不定芽再生具有促進(jìn)作用，但所需濃度不同，2,4-D濃度需低于0.2mg·L-1，高濃度會(huì)抑制不定芽的分化，且芽畸形并黃花嚴(yán)重。NAA所需濃度較大，適宜濃度范圍是0.8-1.0mg·L-1。最適培養(yǎng)基：2.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-1NAA+6mg·L-1AgNO3+20g·L-1蔗糖+8g·L-1瓊脂，不定芽再生率可以達(dá)到68.3％。 2

4、.溫州盤菜離體培養(yǎng)過程中生理生化變化生理生化變化是組織形態(tài)變化的基礎(chǔ)，植物離體培養(yǎng)不定芽再生過程中，由于硝酸銀對(duì)盤菜不定芽的再生具有促進(jìn)作用,本試驗(yàn)在最適培養(yǎng)基上添加最適濃度的硝酸銀和不添加硝酸銀作為對(duì)照處理，測(cè)得不定芽再生過程中的一些重要物質(zhì)的生理生化變化規(guī)律，結(jié)果如下： 2.1SOD活性變化SOD在培養(yǎng)初活性很高，后逐漸下降，在不定芽分化期有小幅上升，在外植體培養(yǎng)后期，SOD活性下降，外植體老化。兩種處理SOD活性變化趨勢(shì)相

5、似。 2.2CAT活性變化在不定芽分化期CAT活性明顯上升，其中有硝酸銀處理的外植體子葉中酶活性稍后高出沒有硝酸銀處理的外植體子葉中酶活性。但在培養(yǎng)后期，兩種處理CAT活性都上升。 2.3POD活性變化POD出現(xiàn)2個(gè)活性高峰，在外植體培養(yǎng)初期，酶活性上升很快，在第3d達(dá)到峰值，此后下降。在不定芽大量出芽期，POD活性又開始上升，硝酸銀處理的外植體子葉中酶活性高于對(duì)照處理。 2.4.PAL活性變化PAI被看作是植物