可表達人CD40Ig融合蛋白的腺病毒載體的構建及其誘導大鼠心臟移植免疫耐受的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究根據免疫耐受的誘導原理,設計和構建了可表達人CD40Ig的腺病毒載體,并在大鼠心臟移植模型中采用CD40Ig基因轉染和供者特異性骨髓輸注的方法,研究探討其誘導移植免疫耐受的作用.主要內容如下:1.構建含有人CD40Ig的Track-CMV-CD40Ig的腺病毒穿梭質粒,經Pme I酶切線性化后與腺病毒骨架質粒Adeasy-1共轉化BJ5183大腸桿菌,在細菌內同源重組,獲得重組腺病毒質粒pAd/CD40Ig,然后轉染293細胞,在

2、其內包裝為完整的腺病毒顆粒.2.用SDS-PAGE電泳和Westernblot免疫印跡的方法,證實了重組腺病毒的正確性.將病毒載體2x10<'8>PFU經尾靜脈注射入大鼠體內48小時后,用ELISA方法可在外周血中檢測到CD40Ig的表達,兩周左右達到高峰,并持續(xù)表達30天以上.3.建立心臟移植模型.采取移植物主動脈-受者左頸總動脈、移植物肺動脈-受者頸外靜脈的方式,將供體心臟移植到受者大鼠的左頸部.4.Ad/CD40Ig單獨應用可以延

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