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1、目的:通過(guò)下調(diào)REV3基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞遺傳信息表達(dá)的影響及對(duì)移植瘤動(dòng)物成瘤的影響,評(píng)價(jià)REV3基因在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用。
方法:利用RNA干擾技術(shù)特異性的降低REV3基因在人類結(jié)腸癌細(xì)胞(SW480、COLO-205)中的表達(dá),并以熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)REV3表達(dá)量的降低情況,選擇具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的REV3低表達(dá)效率細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞。通過(guò)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線、MTT、微核和姐妹染色單體交換等指標(biāo)的檢測(cè),分析目的基因?qū)δ[瘤細(xì)胞
2、生長(zhǎng)、遺傳不穩(wěn)定產(chǎn)生等遺傳信息表達(dá)的影響,同時(shí)通過(guò)將下調(diào)REV3基因的結(jié)腸癌細(xì)胞移植到裸鼠體內(nèi),觀察和分析移植瘤動(dòng)物成瘤的差異情況。
結(jié)果:REV3低表達(dá)的結(jié)腸癌細(xì)胞在細(xì)胞生長(zhǎng)、微核、姐妹染色單體交換等遺傳信息表達(dá)和裸鼠成瘤等方面均明顯低于對(duì)照組細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(<0.05);結(jié)腸癌細(xì)胞的兩對(duì)照組間(陰性和空白)實(shí)驗(yàn)結(jié)果雖然有一定的差異,但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示,REV3低表達(dá)時(shí),可能對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞(SW480、C
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