彩超評價(jià)早期糖尿病腎病小鼠腎臟血流動力學(xué)改變及其病理學(xué)基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的：糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）在早期常缺乏明顯特異的癥狀和體征，如果不采取有效措施盡早發(fā)現(xiàn)并控制其發(fā)展，將會大大增加其對患者的危害，因此DN的早期診斷和治療極其重要。臨床上證實(shí)，彩色多普勒超聲檢查技術(shù)尤其是頻譜多普勒技術(shù)可以通過檢測腎臟血流動力學(xué)指標(biāo)的變化，對早期DN的鑒別有一定作用。由于臨床上為診斷早期DN而做腎臟穿刺活檢術(shù)的患者很少，缺少可靠的病理學(xué)證據(jù)，一定程度上影響了彩色多普勒技術(shù)診斷早期DN

2、的可信度。本實(shí)驗(yàn)通過制備小鼠糖尿病動物模型，在能夠得到確鑿的病理學(xué)證據(jù)前提下，探討彩色多普勒超聲檢查技術(shù)通過觀察腎臟血流分布情況并測定腎臟血流動力學(xué)指標(biāo)對診斷早期DN的價(jià)值。
　　 方法：8周齡C57BL小鼠，體質(zhì)量23-25g。腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)成功制備1型糖尿病小鼠動物模型16只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組1、2（各8只），并分別飼養(yǎng)8周、16周達(dá)到16周齡、24周齡；另取18只正常小鼠作為對照組，隨機(jī)分為對照組0、1、2（各

3、6只），分別飼養(yǎng)0周、8周、16周；達(dá)到周齡后記錄各組小鼠體質(zhì)量及24h尿蛋白含量；彩色多普勒超聲清晰顯示各組小鼠左側(cè)腎臟冠狀切面血流分布情況后，獲取小鼠左側(cè)腎臟段動脈水平收縮期峰值流速(Vsmax)、舒張期最低流速（Vdmin）及阻力指數(shù)(RI)：脫頸處死小鼠后，各組取小鼠左側(cè)腎臟標(biāo)本，采用切片HE、PAS染色及透射電鏡進(jìn)行腎臟病理學(xué)觀察，定量測定并分析腎小球球囊面積(S1)、毛細(xì)血管叢面積(S2)、S2/S1值及腎小球毛細(xì)血管基底膜

4、厚度(TGBM)。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組1小鼠體質(zhì)量低于對照組1，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（24.16±0.60vs24.53±0.56g，P＞0.05）；實(shí)驗(yàn)組2小鼠體質(zhì)量低于對照組2（21.60±1.93vs24.72±0.58g，P＜0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)組2小鼠體質(zhì)量顯著低于實(shí)驗(yàn)組1（21.60±1.93vs24.16g，P＜0.01），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各對照組之間小鼠24h尿蛋白差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（25.30±

5、8.24 vs27.82±7.78vs29.71±10.03μg/L，P＞0.05）；實(shí)驗(yàn)組1與對照組1小鼠24h尿蛋白量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（31.86±8.32vs27.82±7.78μg/L，P＞0.05），而實(shí)驗(yàn)組2小鼠24h尿蛋白含量明顯高于對照組2（51.94±13.52vs29.71±10.03μg/L，P＜0.01）及實(shí)驗(yàn)組1(51.94±13.52vs31.86±8.32μg/L，P＜0.01)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。彩色

6、多普勒超聲觀察：實(shí)驗(yàn)組1中小鼠腎臟血流信號分布與對照組相比無明顯變化；實(shí)驗(yàn)組2中小鼠腎臟主腎動脈、段動脈血流信號清晰可見，部分葉間動脈粗細(xì)不等，部分弓形動脈血流信號減少，彩色多普勒血流呈非典型樹支狀分布；各個(gè)對照組腎臟血流動力學(xué)指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[Vsmax（20.16±4.82，20.75±6.61，19.09±2.54cm/s,P＞0.05），Vdmin(8.42±2.64,7.73±2.48,7.70±2.09cm/s,P＞0.

7、05)，RI（0.59±0.04，0.60±0.02，0.61±0.03，P＞0.05）]。實(shí)驗(yàn)組1小鼠段動脈水平血流動力學(xué)指標(biāo)與對照組1相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[Vsmax(19.67±3.97vs20.75±6.61cm/s,P＞0.05),Vdmin(7.99±1.42vs7.73±2.48cm/s,P＞0.05),RI(0.60±0.03vs0.60±0.02 cm/s,P＞0.05)]；實(shí)驗(yàn)組2小鼠腎臟段動脈水平Vsmax、Vd

8、min較對照組2、實(shí)驗(yàn)組1都降低(Vsmax:14.52±1.58vs19.09±2.54,19.67±3.97cm/s,P＜0.01；Vdmin：4.42±0.82vs7.70±2.09，7.99±1.42cm/s，P＜0.01)，而RI值較對照組2、實(shí)驗(yàn)組1顯著增高(RI:0.68±0.04vs0.61±0.03，0.60±0.03，P＜0.01)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。病理學(xué)觀察：光鏡下，實(shí)驗(yàn)組腎小球系膜區(qū)擴(kuò)張，腎小球毛細(xì)血管充血

9、；圖像分析結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組2S1及S2較對照組2顯著增大[S1（452.66±53.75vs332.51±32.84μm2，P＜0.01），S2(300.82±32.40vs201.33±23.25μm2，P＜0.01)]，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，S2/S1(％)值較對照組2稍增大(66.62±3.74vs60.5±2.07，P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。電鏡下，實(shí)驗(yàn)組腎小球毛細(xì)血管基底膜臟層上皮細(xì)胞部分足突融合、增寬，圖像分析結(jié)果顯

10、示，實(shí)驗(yàn)組1腎小球毛細(xì)血管基底膜較對照組1增厚(178.53±13.46vs151.39±11.11nm，P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)組2腎小球毛細(xì)血管基底膜較對照組2顯著增厚(199.62±15.16vs150.89±11.74nm，P＜0.01)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)組2腎小球毛細(xì)血管基底膜較實(shí)驗(yàn)組1增厚(199.62±15.16vs178.53±13.46nm，P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)

11、論：實(shí)驗(yàn)組2中小鼠腎臟主腎動脈、段動脈血流信號清晰可見，部分葉間動脈粗細(xì)不等，部分弓形動脈血流信號減少，彩色多普勒血流呈非典型樹支狀分布；實(shí)驗(yàn)組1中小鼠腎臟血流信號分布與對照組相比無明顯變化；實(shí)驗(yàn)組2小鼠腎臟血流動力學(xué)指標(biāo)，Vsmax、Vdmin與對照組、實(shí)驗(yàn)組1相比均降低，RI值增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示早期DN腎臟血流分布及血流動力學(xué)出現(xiàn)變化。實(shí)驗(yàn)組小鼠腎臟腎小球系膜區(qū)擴(kuò)張，腎小球毛細(xì)血管充血，毛細(xì)血管基底膜臟層上皮細(xì)胞部分足突