光動(dòng)力療法聯(lián)合EDTA應(yīng)用于根管消毒的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　根管消毒是根管治療中的關(guān)鍵步驟，其目的是徹底清除根管內(nèi)的感染源、預(yù)防再感染，目前根管消毒還未達(dá)到非常理想的程度，因此有必要尋找一種更有效、徹底的根管消毒方法。光動(dòng)力療法(photodynamic therapy，PDT)是光、光敏劑和氧共同參與，可產(chǎn)生強(qiáng)氧化性的單態(tài)氧殺傷致病微生物的一種新療法，它具有抗菌作用強(qiáng)、抗菌譜廣、作用迅速、安全性好且不會(huì)產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)。EDTA（乙二胺四乙酸二鈉）作為根管沖洗劑具有滲透性強(qiáng)、

2、能去除根管內(nèi)玷污層等優(yōu)點(diǎn)。本研究結(jié)合光動(dòng)力療法與EDTA的優(yōu)點(diǎn)將二者聯(lián)合應(yīng)用，首先對(duì)根管內(nèi)感染的主要致病菌懸液進(jìn)行作用，篩選出二者聯(lián)合時(shí)光動(dòng)力療法的最佳效應(yīng)參數(shù)，然后在體外建立根管感染模型，探究二者聯(lián)合進(jìn)行根管消毒的效果，期望找到一種更加安全、有效的根管消毒方法。
　　方法:
　　1.將糞腸球菌標(biāo)準(zhǔn)株(E.faecalis ATCC29212)復(fù)蘇厭氧培養(yǎng)48 h，調(diào)整濃度制備成1×109CFU/mL的菌懸液。
　　2

3、.菌懸液經(jīng)17％ EDTA處理后，用波長532nm半導(dǎo)體激光器分別照射30s、60s、90s、120s與不同濃度光敏劑血卟啉單甲醚(hematoporphyrin monomethylether,HMME)20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml進(jìn)行作用，選擇出EDTA預(yù)處理后光動(dòng)力療法的最佳參數(shù)。
　　3.收集因正畸拔除的離體前磨牙75顆，采用冠向下法進(jìn)行根管預(yù)備，將糞腸球菌在根管內(nèi)連續(xù)培養(yǎng)21天建立糞腸球菌感染模型。

4、r>　　4.將感染模型隨機(jī)均分為5組，A組:PDT處理組;B組:EDTA處理組;C組:PDT聯(lián)合EDTA處理組;D組:NaClO陽性對(duì)照組;E組:生理鹽水陰性對(duì)照組。各組處理前、處理后分別用紙尖在根管內(nèi)取樣，進(jìn)行平板菌落計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)分析，評(píng)價(jià)PDT聯(lián)合EDTA進(jìn)行根管消毒的即刻效果。
　　5.進(jìn)行回復(fù)實(shí)驗(yàn)，在處理后的根管內(nèi)注滿無菌液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)7天后用紙尖取樣，統(tǒng)計(jì)檢出細(xì)菌的根管個(gè)數(shù)，統(tǒng)計(jì)分析，評(píng)價(jià)PDT聯(lián)合EDTA進(jìn)行根管消毒的

5、遠(yuǎn)期效果。
　　6.掃描電子顯微鏡觀察處理后的根管內(nèi)壁形態(tài)，進(jìn)一步驗(yàn)證PDT聯(lián)合EDTA進(jìn)行根管消毒的效果。
　　結(jié)果:
　　1.在本實(shí)驗(yàn)條件下，糞腸球菌菌懸液經(jīng)17％ EDTA預(yù)處理后光動(dòng)力療法的最佳效應(yīng)參數(shù)為:光敏劑HMME濃度40μg/ml;波長532nm、功率密度0.14W/cm2半導(dǎo)體激光器連續(xù)照射90s。
　　2.PDT聯(lián)合17％ EDTA對(duì)感染根管內(nèi)糞腸球菌殺傷結(jié)果顯示，與生理鹽水陰性對(duì)照組相比，P

6、DT處理組、EDTA處理組、PDT聯(lián)合EDTA處理組、NaClO陽性對(duì)照組根管內(nèi)糞腸球菌數(shù)目均顯著減少（P＜0.05）;單獨(dú)PDT組殺菌率為89.77％，與NaClO陽性對(duì)照組相比無顯著差異(P＞0.05);PDT聯(lián)合EDTA組殺菌率達(dá)到100％，明顯高于單獨(dú)PDT處理組、單獨(dú)EDTA處理組、NaClO陽性對(duì)照組和生理鹽水陰性對(duì)照組(P＜0.05）。
　　3.回復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，生理鹽水陰性對(duì)照組與單獨(dú)EDTA處理組中全部根管都檢出

7、了細(xì)菌，有菌根管比例達(dá)100％;單獨(dú)PDT處理組和NaClO陽性對(duì)照組檢出細(xì)菌根管個(gè)數(shù)分別為12個(gè)和13個(gè)，有菌根管比例分別為80.00％和86.67％;PDT聯(lián)合EDTA組檢出細(xì)菌根管數(shù)僅為4個(gè)，有菌根管比例僅為26.67％，明顯少于單獨(dú)PDT處理組、單獨(dú)EDTA處理組、NaClO陽性對(duì)照組和生理鹽水陰性對(duì)照組(P＜0.05)。
　　4.掃描電子顯微鏡圖像顯示:PDT聯(lián)合EDTA組根管內(nèi)壁無玷污層及細(xì)菌附著，全部牙本質(zhì)小管口呈開

8、放狀態(tài);牙本質(zhì)小管通暢，無玷污栓阻塞，內(nèi)壁光滑無細(xì)菌附著。
　　結(jié)論:
　　1.光動(dòng)力療法聯(lián)合EDTA對(duì)體外游離的糞腸球菌有很好的殺滅作用，糞腸球菌菌懸液經(jīng)17％EDTA預(yù)處理后光動(dòng)力療法的最佳效應(yīng)參數(shù)為:光敏劑HMME濃度40μg/ml;波長532nm、功率密度0.14W/cm2半導(dǎo)體激光器連續(xù)照射90s。
　　2.光動(dòng)力療法聯(lián)合EDTA進(jìn)行根管消毒，不但能去除根管內(nèi)玷污層，而且.還能有效殺滅根管內(nèi)糞腸球菌，并且有較