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1、目的:該實(shí)驗(yàn)通過轉(zhuǎn)染DNA-PKcs反義寡核苷酸入p53功能正常和異常的鼻咽癌細(xì)胞株,干擾DNA-PKcs的mRNA翻譯過程,觀察特異性地抑制DNA-PKcs蛋白表達(dá)對(duì)鼻咽癌細(xì)胞放射敏感性的影響.方法:用Western blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染了野生型p53基因和未轉(zhuǎn)染野生型p53基因的鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1和CNE-2內(nèi)p21蛋白的表達(dá);利用Lipofectamine<'TM>2000作為載體把DNA-PKcs反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞C
2、NE-1和CNE-2中,特異性地抑制DNA-PKcs表達(dá);用集落形成法分析轉(zhuǎn)染DNA-PKcs反義寡核苷酸后細(xì)胞的存活情況;用線性二次模型和單擊多靶模型擬合求出放射生物學(xué)參數(shù)α、β、α/β、SF<,2>、D<,0>、D<,q>和N,評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染DNA-PKcs反義寡核苷酸后放射敏感性的變化.結(jié)論及意義:未轉(zhuǎn)染野生型p53基因的CNE-1及CNE-2細(xì)胞在阿霉素處理前后,p21蛋白表達(dá)變化不明顯,提示p53功能缺陷.而轉(zhuǎn)染了野生型p53基因的
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