外周T細胞淋巴瘤間質(zhì)微環(huán)境臨床意義的初步探索.pdf

1、1.研究背景與目的:
　　 外周T細胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphoma，PTCL)是一組高度異質(zhì)性的非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma，NHL)，根據(jù)其形態(tài)學、免疫表型、遺傳學和臨床特點等可以分為多種亞型。絕大部分亞型屬于侵襲性淋巴瘤，傳統(tǒng)化療可取得一定的近期療效，但緩解期較短，容易復發(fā)或發(fā)生耐藥，除ALK+間變性大細胞淋巴瘤外，其余亞型預后較差。尋找有效的預后預測因子，早期

2、鑒別出對常規(guī)治療療效不佳的高危病例，并給予更積極有效的治療，是改善PTCL治療預后的關(guān)鍵之一。
　　 針對臨床不良預后因素的國際預后指數(shù)IPI(International Prognostic Index)和外周T細胞淋巴瘤預后指數(shù)PIT(Prognostic Index for PTCL-NOS)是PTCL患者危險度分層的常用工具。但它們僅從年齡、PS狀態(tài)及幾個間接臨床指標(如LDH水平、分期、結(jié)外病灶或骨髓侵犯等)來預測疾病

3、的轉(zhuǎn)歸和預后，無法揭示疾病本身的遺傳學和生物學差異，再加上PTCL生物學異質(zhì)性較大，因此常?？梢钥吹?，即使IPI或PIT評分相同的患者預后情況亦不完全相同。因此有必要尋找一些新的生物學指標以期更準確地預測PTCL患者的預后，早期篩選出高危病例，給予更高水平的個體化治療，以期提高PTCL的整體治療水平。
　　 淋巴瘤微環(huán)境是近年討論的熱點。它由許多間質(zhì)細胞組成，主要包括主動和被動免疫炎癥細胞、組成新生微血管的內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等

4、。越來越多的研究表明，淋巴瘤的生物學特性和臨床預后不僅取決于腫瘤細胞本身，還決定于淋巴瘤細胞與周邊非腫瘤間質(zhì)細胞的交互作用。
　　 在B細胞淋巴瘤中，基因芯片研究已經(jīng)證實，濾泡性淋巴瘤(Follicularlymphoma，F(xiàn)L)患者的生存時間與初診時浸潤于腫瘤間質(zhì)的免疫細胞的分子特征相關(guān)，彌漫大B細胞淋巴瘤(Diffuse large B cell lymphoma，DLBCL)間質(zhì)微環(huán)境中免疫細胞、纖維化和血管生成的差異影響

5、治療的預后。針對問質(zhì)不同細胞成分的免疫組化研究也發(fā)現(xiàn)，淋巴瘤相關(guān)巨噬細胞(Lymphoma associatedmacrophage，LAM)作為最主要的間質(zhì)炎癥細胞群，在大多數(shù)淋巴瘤中均可見浸潤表達，LAM高表達是接受單純化療FL患者的不良預后因素；衡量淋巴瘤血管生成的微血管密度(Microvessel density，MVD)在侵襲性淋巴瘤如伯基特淋巴瘤、DLBCL中有高于惰性淋巴瘤如FL、小淋巴細胞性淋巴瘤的趨勢，由于淋巴瘤細胞本

6、身及其間質(zhì)微血管生成的異質(zhì)性，對應(yīng)特定的病理亞型，MVD與臨床預后的相關(guān)性尚不明確；腫瘤反應(yīng)性間質(zhì)中活化的成纖維細胞，即腫瘤相關(guān)成纖維細胞(Tumor associated fibroblast，TAF)的高表達與結(jié)直腸癌、胰腺癌和乳腺癌等多種上皮性腫瘤的惡性度增高和不良預后相關(guān)，而TAF與淋巴瘤生物學和臨床預后相關(guān)性的研究則鮮有報道。
　　 本研究目的在于檢測PTCL微環(huán)境中三種主要成分巨噬細胞(LAM)、成纖維細胞(LAF)

7、和微血管(MVD)的表達情況，并分析上述指標與患者臨床特征、近期療效和遠期生存的關(guān)系，評價這三種間質(zhì)成分的預后預測價值，初步窺探PTCL間質(zhì)微環(huán)境對預后的影響作用。
　　 2.研究方法:
　　 研究收集中山大學腫瘤防治中心于1995年9月至2008年9月間收治的外周T細胞淋巴瘤患者臨床資料和病理蠟塊共64例，采用免疫組織化學方法(二步法)檢測其腫瘤間質(zhì)中CD68(標記LAM)、α-SMA(標記LAF)和CD34(標記血管

8、內(nèi)皮細胞)的表達情況，計數(shù)各病例LAM、LAF和MVD，并以均值為最佳臨界值對這三個指標表達水平進行分組。分析PTCL間質(zhì)中LAM、LAF表達和MVD計數(shù)水平的兩兩相關(guān)性及它們與治療前臨床特征、近期療效和遠期生存的關(guān)系。用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。
　　 3.結(jié)果:
　　 3.1臨床資料
　　 全組64例PTCL患者中位年齡51歲(15-78歲)，男女比例為2.2：1。所有病例均經(jīng)病理組織學證實，全

9、身狀況較好(PS ECOG0-1分)，病理亞型以外周T細胞性淋巴瘤，非特指型(PTCL-NOS)為主，共28例(43.8％)，其它包括NK/T細胞淋巴瘤16例(25.0％)，血管免疫母細胞性淋巴瘤10例(15.6％)，間變大細胞性淋巴瘤10例(15.6％)。其中Ann Arbor分期Ⅲ-Ⅳ期者30例(46.9％)；LDH升高者38例(59.4％)；有結(jié)外侵犯者44例(68.8％)，結(jié)外病灶＞1處者21例(32.8％)；有B癥狀者33例(

10、51.6％)；伴巨大腫塊者13例(20.3％)；有骨髓侵犯者7例(10.9％)；IPI低危36例(56.3％)，低中危13例(20.3％)，中高危10例(15.6％)，高危5例(7.8％)。全組64例患者中，4例單純行手術(shù)治療，1例單純放射治療，其余59例接受聯(lián)合化療，可評價客觀療效者57例。初治化療方案以CHOP為主(38例，占64.4％)?？偟目陀^有效率(CR+PR)為73.7％(42/57)，CR率為50.9％(29/57)，SD

11、和PD共為26.3％(15/57)。
　　 3.2實驗結(jié)果
　　 3.2.1 PTCL間質(zhì)中LAM、LAF表達和MVD計數(shù)情況
　　 64例PTCL間質(zhì)中LAM、LAF和MVD的計數(shù)均值分別為87.33±47.13個/HPF(范圍14-250個/HPF)、52.64±47.33個/HPF(范圍0-230個/HPF)和26.25±20.06個/HPF(范圍3-125個/HPF)。根據(jù)分析目的，分別以各指標均值作為最

12、佳臨界值，將LAM、LAF分為低表達和高表達，將MVD分為低水平和高水平。于是，全組64例PTCL患者中，LAM低表達36例(56.3％)，高表達28例(43.7％)；LAF低表達46例(71.9％)，高表達18例(28.1％)；MVD計數(shù)低水平40例(62.5％)，高水平24例(37.5％)。LAM、LAF的表達及MVD計數(shù)水平在不同病理亞型間未見明顯統(tǒng)計學差異。
　　 LAM表達與MVD計數(shù)水平呈正相關(guān)(P=0.015)，而

13、LAF表達與MVD計數(shù)水平、LAM與LAF表達水平均不具有明顯相關(guān)關(guān)系(P=0.193；P=0.107)。
　　 3.2.2 LAM、LAF表達和MVD計數(shù)與臨床特征的關(guān)系
　　 LAM高表達與伴隨B癥狀和結(jié)外侵犯相關(guān)，而與年齡、分期、血清LDH水平等治療前臨床特征均無相關(guān)性。LAF表達強度、MVD計數(shù)水平分別與年齡、分期、血清LDH水平、結(jié)外病灶數(shù)目、骨髓侵犯等臨床特征均未見明顯相關(guān)性。
　　 3.2.3 LA

14、M、LAF表達和MVD計數(shù)與近期療效的關(guān)系
　　 LAM低表達組初始化療有效率優(yōu)于高表達組(86.6％vs59.3％，P=0.019)，且CR率亦有下降的趨勢(40.7％vs60.0％，P=0.146)。LAF低表達組化療有效率和CR率分別為71.4％和45.2％，高表達組為80.0％和66.7％，兩組間近期療效差異未見明顯統(tǒng)計學差異(P值均大于0.05)。MVD計數(shù)低水平組化療有效率和CR率分別為72.7％和48.5％，高水平

15、組為75.0％和54.2％，兩組間近期療效差異未見明顯統(tǒng)計學差異(P值均大于0.05)。38例CHOP化療病例(36例可評價療效)中LAM、LAF表達和MVD計數(shù)水平與近期療效均無相關(guān)性。
　　 3.2.4 LAM、LAF表達和MVD計數(shù)與遠期預后的關(guān)系
　　 全組64例患者中位生存期30.4個月(95％置信區(qū)間7.4-53.4個月)，1、3和5年OS分別為71.6％、47.4％和35.2％。LAM低表達組和高表達組的中

16、位生存期分別為45.5個月和15.3個月(P=0.085)，LAM低表達者生存有改善的趨勢。LAF低表達組和高表達組的中位生存期分別為22.0個月和未達到，兩組生存情況未見明顯統(tǒng)計學差異(P=0.157)。MVD計數(shù)低水平組和高水平組中位生存期分別為30.4個月和28.3個月，兩組生存情況未見明顯統(tǒng)計學差異(P=0.843)。
　　 4.結(jié)論:
　　 ①PTCL間質(zhì)中可見大量CD68陽性巨噬細胞浸和CD34陽性微血管增生

17、，而α-SMA陽性成纖維細胞則較少表達。
　　 ②LAM高表達與伴隨B癥狀和結(jié)外器官侵犯相關(guān)，而LAF表達強度和MVD計數(shù)水平與各種治療前臨床特征無明顯相關(guān)性。
　　 ③LAM表達與PTCL初始化療近期療效相關(guān)，高表達者有效率較差，CR率亦有下降的趨勢。
　　 ④LAM表達與PTCL患者遠期生存具有一定的相關(guān)性，低表達患者生存較高表達患者有改善的趨勢，LAM的確切價值，仍需更大樣本的前瞻性臨床研究進一步加以驗證。