中期因子、肝素酶在食管鱗癌組織中的表達及意義.pdf

1、惡性腫瘤是嚴重威脅人類健康的重大疾病之一,近些年在中國乃至世界上,惡性腫瘤呈現(xiàn)上升趨勢。據(jù)WHO專家預測,腫瘤將會成為21世紀人類第一殺手。研究表明,在惡性腫瘤分化、發(fā)生發(fā)展過程中是經歷了多步驟的過程,從不典型增生到原位癌、浸潤癌,在分子水平上有許多改變,包括生長因子/受體基因等表達在一些惡性腫瘤中已經提示為癌變的一個重要因素,尋求一種新的腫瘤標志物,并闡明它與惡性腫瘤生物學特性的關系,為惡性腫瘤的早期診斷以及治療提供理論依據(jù)顯得尤為迫

2、切。近年來,相繼克隆出多種與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉移相關的基因,其中中期因子(Midkine,MK)是一種新發(fā)現(xiàn)的肝素結合性生長因子,首先在視磺酸誘導分化早期的胚胎瘤中被發(fā)現(xiàn),但與其它肝素結合性生長因子性質截然不同。在多種腫瘤中,與周圍非癌組織相比,中期因子在腫瘤組織中出現(xiàn)過表達,如乳腺癌、胃癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、膀胱癌、結腸癌、神經母細胞瘤、Wilm’s瘤等。中期因子除在惡性腫瘤組織中有高表達外,在腫瘤早期、潛伏期和癌前病變階段也

3、呈高水平表達。目前大量的研究表明它與多種腫瘤生長、分化、血管生成、侵襲、轉移及預后有關。腫瘤細胞要實現(xiàn)侵襲和轉移,首先必須突破由基底膜(basement membrane,BM)和細胞外基質(extracellular matrix,ECM)構成的組織屏障。乙酰肝素(heparan sulfate,HS)又稱硫酸肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycan,HSPG)是細胞外基質(ECM)和細胞表面的生物大分子

4、,是基底膜(BM)的主要構成成分。肝素酶(heparanase,HPA)是一種葡萄糖苷酸內切酶,可水解乙酰肝素側鏈與其核心蛋白相連的糖苷鍵,直接破壞ECM和BM。近來的研究發(fā)現(xiàn),肝素酶不僅可以特異性地降解該屏障的主要成分—硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparansulfate proteoglycan,HSPG),還能協(xié)同多種因子,通過多條途徑直接和間接地促進腫瘤的浸潤和轉移,因而成為近年來腫瘤轉移機制和對策研究的熱點。中國是世界上食管癌發(fā)

5、病率和死亡率最高的國家,河南省食管癌發(fā)病率和死亡率均居中國首位,而浸潤、轉移是導致食管癌患者死亡的主要原因,因此探討食管癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉移機制已成為研究的熱點之一。有關MK及HPA在食管鱗癌組織中的表達及意義的研究,至今國內外鮮見文獻報道,為進一步探討MK及HPA表達與食管癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉移的關系,尋找診斷及抑制食管癌浸潤、轉移的有效方法,提高食管癌患者的生存時間、降低死亡率。本研究采用免疫組化SP法,分別觀察了高發(fā)區(qū)4

6、9例食管鱗癌組織、20例癌旁不典型增生組織及49例正常粘膜組織中MK及HPA蛋白的表達情況,二者的聯(lián)合檢測為進一步探討食管癌的浸潤轉移機制,有效地阻斷食管癌的浸潤轉移提供了理論基礎。方法1.采用免疫組化SP法分別對49例食管鱗癌組織、20例癌旁不典型增生組織及49例正常食管粘膜組織中MK及HPA蛋白的表達進行檢測。2.統(tǒng)計學處理:所有數(shù)據(jù)均經SPSS11.0軟件進行統(tǒng)計分析。陽性率之間的比較大樣本采用x~2檢驗(chi-square)小

7、樣本采用Fisher精確檢驗;兩變量之間的關系分析采用spearman等級相關分析表示。顯著性水準α=0.05。結果1.正常食管粘膜組織中MK蛋白陽性表達率為0.00％(0/49),不典型增生組織中MK蛋白陽性表達率為50.00%(10/20),食管鱗癌組織中MK蛋白陽性表達率為79.59%(39/49);食管鱗癌組織中MK蛋白陽性表達率與相應的癌旁不典型增生組織及正常食管粘膜組織兩兩相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。2.正常食

8、管粘膜組織中HPA蛋白陽性表達率為0.00%(0/49)。不典型增生組織中HPA蛋白陽性表達率為55.00%(11/20),食管鱗癌組織中HPA蛋白陽性表達率為65.31%(32/49);食管鱗癌組織中HPA蛋白表達與癌旁不典型增生組織相比,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)3.21例伴有淋巴結轉移的食管鱗癌組織中MK蛋白陽性表達率為95.24%(20/21),無淋巴結轉移的28例食管鱗癌組織中MK蛋白陽性表達率為67.86%(19/28

9、),兩組間食管鱗癌組織中MK蛋白陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。4.21例伴有淋巴結轉移的食管鱗癌組織中HPA蛋白陽性表達率為100%(21/21),無淋巴結轉移的28例食管鱗癌組織中HPA蛋白陽性表達率為39.29%(11/28),兩組間食管鱗癌組織中HPA蛋白陽性率比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。5.無浸潤、浸潤達淺肌層、深肌層和食管外膜的食管鱗癌組織中MK蛋白陽性率分別為:40.00%(2/5)、57.14%(4/

10、7)、77.78%(14/18)和100%(19/19)。浸潤達外膜的食管鱗癌組織中MK蛋白陽性率明顯高于前三者,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而浸潤達深肌層的食管鱗癌組織中MK蛋白陽性表達率與浸潤達淺肌層相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。6.無浸潤、浸潤達淺肌層、深肌層和食管外膜的食管鱗癌組織中HPA蛋白陽性率分別為:20.00%(1/5)、42.86%(3/7)、50.00%(9/18)和100%(19/19),浸潤達食管外

11、膜的食管鱗癌組織中HPA蛋白陽性率明顯高于前三者,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而浸潤達深肌層的食管鱗癌組織中HPA蛋白陽性表達率與浸潤達淺肌層相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。7.MK蛋白及HPA蛋白在食管鱗癌中的表達相關性經統(tǒng)計學分析顯示,兩者之間呈正相關關系(P<0.01)。結論1.食管鱗癌組織、癌旁不典型增生組織及正常食管粘膜組織中MK蛋白陽性表達率均依次降低,三者相比差異有統(tǒng)計學意義,表明MK參與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展過程

12、。2.正常食管粘膜組織中HPA蛋白表達為陰性。食管鱗癌組織中HPA蛋白陽性表達率較癌旁不典型增生組織中稍高,但兩者相比差異無統(tǒng)計學意義,表明HPA與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展無密切關系。3.隨著食管鱗癌細胞浸潤深度的加深,MK、HPA蛋白陽性表達率逐漸升高,且浸潤達食管外膜層的食管鱗癌組織中MK、HPA蛋白陽性表達率明顯高于無浸潤、浸潤達淺肌層和深肌層的相應組織;MK、HPA蛋白陽性表達率在淋巴結轉移組高于無淋巴結轉移組。提示MK、HPA與食管