低強度雙波長激光治療儀的研制和激光照射對巨噬細胞功能影響的實驗研究.pdf

1、目的：
　　低強度激光生物刺激效應在傷口愈合和組織修復上的作用，明確指出了低強度激光生物刺激效應能影響多種細胞的功能行為，而且可能同時產(chǎn)生這些影響。但是，低強度激光生物刺激效應的確切機制目前仍然不清楚。為闡明低強度激光生物刺激效應的機制，需要更多細胞和分子水平的深入研究。激光輻照的生物效應取決于激光的波長、功率和照射劑量等。迄今為止，研究激光輻照巨噬細胞的生物效應實驗多采用He-Ne激光，而650nm、532nm波長激光卻很少涉及

2、。本論文擬研制能夠輸出兩種波長激光的雙波長半導體激光治療儀，然后建立一種小鼠腹腔巨噬細胞的分離和培養(yǎng)方法，進而研究低強度650nm、532nm激光輻照對小鼠腹腔巨噬細胞功能的影響。
　　方法：
　　⑴雙波長半導體激光治療儀采用單片機AT89S51智能控制，通過人機對話接口實現(xiàn)對輸出功率、工作時間的連續(xù)調(diào)節(jié)；⑵用不含小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液灌洗小鼠腹腔，分離獲取小鼠腹腔巨噬細胞，在含有10％小牛血清的RPMI-164

3、0培養(yǎng)液中培養(yǎng)。采用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)，臺盼藍染色計算存活率，瑞氏染色計算純度；⑶用不同功率和照射時間的650nm、532nm激光輻照小鼠腹腔巨噬細胞，采用中性紅吞噬實驗測定小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬能力；⑷用10mW的低強度650nm、532nm激光輻照小鼠腹腔巨噬細胞，時間分別為1d、3d、5d、7d、9d，每天照射10min，采用比色法測定小鼠腹腔巨噬細胞LDH和ACP活性。
　　結(jié)果：
　?、烹p波長半導體激光治療儀可

4、以輸出650nm、532nm兩種波長激光，輸出功率、工作時間連續(xù)可調(diào)；⑵論文設(shè)計的實驗方法獲得的小鼠腹腔巨噬細胞純度較高，具備巨噬細胞的形態(tài)特征；⑶在適當?shù)募す夤β屎驼丈鋾r間時，小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬能力有顯著性增強，并且相同功率的低強度650nm、532nm激光照射后小鼠腹腔巨噬細胞吞噬能力隨照射時間的變化規(guī)律相似，532nm激光照射后的巨噬細胞吞噬能力強于650nm激光；⑷低強度650nm、532nm激光照射后小鼠腹腔巨噬細胞的LD

5、H和ACP活性顯著增強，并且LDH和ACP活性隨照射時間的增加呈先增大后減小的趨勢，在7d時達到最大，9d時減小。
　　結(jié)論：
　　⑴研制的雙波長半導體激光治療儀能夠輸出兩種波長激光，輸出功率和工作時間可以連續(xù)調(diào)節(jié)，體積小、操作簡單，適用于臨床照射治療,具有非常好的應用前景；⑵所設(shè)計的實驗方法能獲得較高純度的小鼠腹腔巨噬細胞，是一種簡便實用的小鼠腹腔巨噬細胞分離培養(yǎng)方法；⑶實驗結(jié)果表明適當劑量的低強度650nm、532nm激