黃瓜果實RFOs降解部位及其與酸、堿性α-半乳糖苷酶關(guān)系的研究.pdf

1、與大多數(shù)高等植物不同，黃瓜(Cucumis sativus L.)是以棉籽糖家族寡糖類(Raffinosefamily oligosaccharides，RFOs)作為光合產(chǎn)物的主要運輸形式（主要是水蘇糖和棉籽糖）。水蘇糖經(jīng)過長距離運輸?shù)竭_果實后，在果實哪個部位分解尚不明確，一種觀點認為RFOs在果柄分解成蔗糖等，再運輸至果實;另一種觀點認為RFOs可以通過果柄運輸?shù)焦麑?，在果實中快速分解。水蘇糖在分解過程中，α-半乳糖苷酶起到重要的作

2、用，而6種α-半乳糖苷酶（三種堿性形式和三種酸性形式）中哪一類或哪一種對分解水蘇糖起主要作用，尚沒有統(tǒng)一觀點。為此，本研究以黃瓜果柄、果實和甜瓜果柄為實驗材料，對韌皮部汁液進行可溶性糖含量的測定。同時，還以黃瓜果柄、果實前端和去除黃瓜第二果實后，第一果實果柄為實驗材料，對可溶性糖含量和6種α-半乳糖苷酶基因表達水平、活性進行比較。推測堿性α-半乳糖苷酶主要負責水蘇糖水解之后，使用特殊化學(xué)誘導(dǎo)表達載體pX6/pX7進行黃瓜兩種堿性α半乳糖

3、苷酶RNAi載體的構(gòu)建，將用于后期黃瓜轉(zhuǎn)基因研究。所得結(jié)果如下:
　　1、黃瓜果柄、果實都是水蘇糖和棉籽糖分解的場所，分解持續(xù)進行。從黃瓜果柄至果實，韌皮部汁液中水蘇糖和棉籽糖的含量逐漸降低，到達果實末端含量最低，蔗糖、果糖和葡萄糖的含量逐漸升高。各種可溶性糖含量從果柄至果實一直存在變化，但變化比較緩慢。
　　2、黃瓜果實水蘇糖卸載中堿性α-半乳糖苷酶起主要作用。對黃瓜果柄和果實前端分段取樣，將6種α-半乳糖苷酶基因表達水平

4、、活性與可溶性糖含量相比較，結(jié)果顯示水蘇糖和棉籽糖的含量與堿性α-半乳糖苷酶基因表達水平和活性變化趨勢相反，而與酸性α-半乳糖苷酶無明顯的關(guān)系。去除第二果實后，對第一果實果柄汁液和組織中可溶性糖含量，以及果柄組織6種α-半乳糖苷酶基因表達水平和活性的研究表明，堿性α-半乳糖苷酶基因表達水平和活性與棉籽糖和水蘇糖上升幅度一致，而酸性α-半乳糖苷酶沒有表現(xiàn)出相應(yīng)的變化趨勢。
　　3、甜瓜果柄存在水蘇糖的分解。甜瓜果柄汁液中，棉籽糖和水