垂絲海棠、楸子的扦插生根機(jī)理研究.pdf

1、本文采用IBA、NAA等外源激素，以不同濃度、不同浸泡時(shí)間處理垂絲海棠、楸子插穗。利用間接酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)和聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)技術(shù)測定了不同生根型的海棠插穗生根過程中幾種內(nèi)源激素(IAA、ABA、ZR、GA等)和可溶性蛋白的變化。弄清了海棠扦插生根過程中，內(nèi)源激素與可溶性蛋白質(zhì)之間的關(guān)系。 本文還研究了海棠的內(nèi)在遺傳因子通過蛋白質(zhì)表達(dá)來控制扦插生根過程，發(fā)現(xiàn)了在扦插生根過程中影響生根的可溶性蛋

2、白種類，內(nèi)外源激素通過蛋白質(zhì)受體對海棠插穗生根的關(guān)系。通過3年多的研究，本文取得了以下研究成果： 1.對外源激素與扦插生根的關(guān)系的研究表明：在供試驗(yàn)的三種激素中，IAA具顯著作用，赤霉素在結(jié)果枝的扦插中與生長素交互起顯著作用。 2.不同時(shí)期扦插對插穗成活率有極顯著影響。在芽萌動(dòng)至展葉期，隨著時(shí)間推移，扦插生根率提高，外源激素處理隨時(shí)間推移效應(yīng)減小。 3.研究發(fā)現(xiàn)，插穗的含水量、蛋白質(zhì)含量、可溶性糖含量等內(nèi)部生理生

3、化因子變化對海棠扦插生根有顯著的影響。通過相關(guān)系數(shù)分析，海棠扦插生根率與束縛水含量達(dá)到極顯著負(fù)相關(guān)，與自由水含量顯著正相關(guān)。生長促進(jìn)類植物內(nèi)源激素隨側(cè)芽位置而變化，離芽越遠(yuǎn)含量越低，脫落酸則出現(xiàn)一定的波動(dòng)。扦插后含水量下降到第九天再上升，蛋白質(zhì)含量、可溶性糖含量及多酚氧化酶等也緩慢上升。激素變化則表現(xiàn)為早期生長素/脫落酸比值及生長素/細(xì)胞分裂素類比值都在第4～6天出現(xiàn)峰值，早期大量生長素的產(chǎn)生證明是扦插所必須的。 4.對這兩種海

4、棠扦插生根過程的解剖學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，垂絲海棠與楸子的插穗莖內(nèi)無潛伏根原基，不定根由誘生根原基發(fā)育形成，誘生根原基源于初生射線與維管形成層交匯處細(xì)胞的分裂分化。經(jīng)15天后，不定根原基發(fā)育為幼小不定根并伸出周皮之外。垂絲海棠插穗經(jīng)過了愈傷組織形成、分化等過程。扦插后10天，愈傷組織開始發(fā)生；隨著愈傷組織進(jìn)一步分裂、分化，約至第40天愈傷組織長出不定根來。 5.對可溶性蛋白質(zhì)與扦插生根研究表明： 垂絲海棠(Malushallian

5、aRoehne)的插穗在生根過程中切口處的46KD，39KD，36KD，28KD，26KD，24KD等可溶性蛋白與插穗生根有關(guān)；39KD，26KD，24KD是三種調(diào)控蛋白，其作用是誘導(dǎo)愈傷組織及不定根的分化，當(dāng)不定根形成后即消失。28KD和31KD蛋白是隨著愈傷組織及不定根產(chǎn)生而新成的蛋白并促進(jìn)垂絲海棠插穗的生根。46KD是一種阻礙愈傷組織再分化的蛋白，對插穗生根有抑制作用。 楸子(MalusprunifoliaBorkh)的插

6、穗在生根過程中切口處的65KD，52KD，43KD，39KD，31KD，28KD，26KD，22KD等蛋白與插穗生根有關(guān)；65KD，39KD，26KD，22KD是四種調(diào)控蛋白，其作用是誘導(dǎo)插穗中形成層產(chǎn)生根原基和不定根的分化，當(dāng)不定根形成后則急劇減少或消失。52KD是一種對根原基產(chǎn)生和不定根的分化有阻礙作用的蛋白，對插穗生根有阻止和抑制作用。用IAA+IBA對楸子插穗處理能誘導(dǎo)產(chǎn)生72KD，83KD二種新的蛋白，這兩種蛋白對插穗生根的數(shù)