栓皮櫟體胚發(fā)生生理生化特性的研究.pdf

1、本文以栓皮櫟優(yōu)樹未成熟合子胚為外植體誘導(dǎo)體胚發(fā)生。研究了體胚誘導(dǎo)過程中的胚性和非胚性愈傷組織之間的生理生化差異，體胚成熟過程中不同碳源、氮源、ABA處理生理生化特性的變化，為建立栓皮櫟體胚發(fā)生再生植株系統(tǒng)提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下： 1.栓皮櫟同一基因型胚性愈傷組織內(nèi)可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、抗氧化物酶活性均明顯高于非胚性愈傷組織，不同基因型之間無明顯差異。 2.比較不同碳源、氮源、ABA對(duì)栓皮櫟體胚成熟和萌發(fā)的影響

2、。結(jié)果表明，5％蔗糖和1.0g/L水解酪蛋白有利于栓皮櫟體胚的成熟和萌發(fā)，5％蔗糖處理體胚成熟率最高，達(dá)到82％；0.5g/L精氨酸和0.5g/L谷氨酰胺有利于栓皮櫟體胚成熟，但沒有顯著促進(jìn)其萌發(fā)；葡萄糖、甘露醇、ABA均不利于栓皮櫟體胚的成熟和萌發(fā)，5％甘露醇處理成熟率與萌發(fā)率僅分別為9％、1.9％。 3.成熟培養(yǎng)基中附加5％蔗糖，栓皮櫟成熟體胚中可溶性蛋白質(zhì)和可溶性糖積累均高于其它碳源處理，8％蔗糖也有利于蛋白質(zhì)和糖的積累，

3、但褐變嚴(yán)重，不利于體胚成熟萌發(fā)。蔗糖濃度越高，CAT酶活性值越大。甘露醇處理下褐變極其嚴(yán)重，其POD與SOD酶活性值明顯高于其它碳源處理。 4.在成熟培養(yǎng)基中分別附加1.0g/L水解酪蛋白、0.5g/L谷氨酰胺、0.5g/L精氨酸，栓皮櫟成熟體胚中可溶性蛋白質(zhì)和可溶性糖含量高于其它氮源處理。附加不同濃度的精氨酸時(shí)，其可溶性蛋白質(zhì)與可溶性糖含量均隨濃度的增加而遞減，而且與成熟率的變化一致。附加不同濃度的水解酪蛋白，其抗氧化物酶活性

4、隨濃度增加而增強(qiáng)。 5.在成熟培養(yǎng)基中附加不同濃度的ABA，栓皮櫟成熟體胚中可溶性蛋白質(zhì)含量均增加，不同濃度間無明顯差異?？扇苄蕴呛烤蟹e累，不加ABA與0.5mg/LABA處理時(shí)糖含量均呈遞增趨勢(shì)。低濃度時(shí)CAT酶活性值較不加ABA增加。隨ABA濃度的增加CAT酶活性有減小的趨勢(shì)。POD與SOD酶活性值均比不加ABA降低。 6.成熟體胚中可溶性蛋白質(zhì)含量有積累、峰值較高的處理其成熟率、萌發(fā)率也較高。體胚中的可溶性糖含