銅綠假單胞菌生物膜懸液和藻酸鹽對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響.pdf

1、第一部分：銅綠假單胞菌生物膜懸液對肺部巨噬細(xì)胞缺乏小鼠的影響 目的：探討含有生物膜成分的銅綠假單胞菌細(xì)菌懸液對肺部巨噬細(xì)胞缺乏小鼠的影響。 方法：建立肺部巨噬細(xì)胞缺乏小鼠的模型，其中肺部巨噬細(xì)胞抑制率在75％～85％之間的為高抑制組，而肺部巨噬細(xì)胞抑制率在8％～15％之間的為低抑制組。用含有生物膜成分的銅綠假單胞菌細(xì)菌懸液分別感染肺部巨噬細(xì)胞缺乏組小鼠和對照組，比較肺、肝、脾組織中的細(xì)菌數(shù)量。 結(jié)果：高抑制組和對

2、照組肺部組織的細(xì)菌數(shù)量分別為(4.16±3.36)×105CFU/ml和(5.15±1.92)×105CFU/ml，t=0.7211，P=0.483；肝組織的細(xì)菌數(shù)量分別為(6.88±3.74)× 105CFU/ml和(2.97±1.57)×105 CFU/ml，T=100.00，P=0.0002；脾組織的細(xì)菌數(shù)量分別為(9.63 4±3.95)×105 CFU/ml和(5.804±2.06)×105 CFU/ml，t=2.4268，P

3、=0.0293；低抑制組和對照組肺部組織的細(xì)菌數(shù)量分別為(1.85±0.889)×105 CFU/ml和(2.06±1.198)×105 CFU/ml，t=0.4026，P=0.6933；肝組織的細(xì)菌數(shù)量分別為(2.00±0.900)×105CFU/ml和(1.76±1.0514)×105CFU/ml，t＝0.4837，P=0.6361；脾組織的細(xì)菌數(shù)量分別為(6.67±2.15)×105CFU/ml和(5.02±2.07)×105 C

4、FU/ml，t＝1.5620,P=0.1406。低抑制組的肺、肝、脾組織的細(xì)菌數(shù)量與對照組相比無明顯差異，高抑制組的肺部組織的細(xì)菌數(shù)量與對照組相比仍然無明顯增多，但是肝、脾組織的細(xì)菌數(shù)量卻明顯高于對照組，說明高抑制組的菌血癥比對照組更嚴(yán)重。 結(jié)論：巨噬細(xì)胞對含有生物膜成分的銅綠假單胞菌細(xì)菌造成的急性肺部感染在對細(xì)菌的肺部清除方面沒有起到積極的抵抗作用，但是卻可以阻止細(xì)菌在體內(nèi)的進(jìn)一步的播散。 第二部分：藻酸鹽對小鼠巨噬細(xì)

5、胞吞噬功能的影響。 目的：探討銅綠假單胞菌生物膜的主要成分藻酸鹽對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響。 方法：提取小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，分別加入銅綠假單胞菌游離細(xì)菌，銅綠假單胞菌生物膜細(xì)菌，銅綠假單胞菌游離細(xì)菌加藻酸鹽，在顯微鏡下觀察記數(shù)巨噬細(xì)胞對細(xì)菌的吞噬率。巨噬細(xì)胞經(jīng)不同濃度的藻酸鹽作用后，中性紅法檢測巨噬細(xì)胞的吞噬能力。 結(jié)果：銅綠假單胞菌生物膜細(xì)菌組的巨噬細(xì)胞吞噬率與銅綠假單胞菌游離細(xì)菌的吞噬率分別為(13.82±4

6、.71)％和(42.73±11.11)％，有顯著差異(Q＝12.3231，P＜0.01)。銅綠假單胞菌游離細(xì)菌加藻酸鹽組的巨噬細(xì)胞吞噬率與銅綠假單胞菌游離細(xì)菌組的吞噬率分別為(22.91±6.20)％和(42.73±11.00)％，也有顯著差異(Q=8.4465，P＜0.01)。當(dāng)藻酸鹽濃度為0、25、50、75、100、125和150μg/ml時，巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的吸光度D(540)值表示其巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力分別為：(0.27

7、1±0.044)(0.456±0.062)(0.445±0.061)(0.551±0.065)(0.210±0.053)(0.186±0.026)和(0.195±0.025)。當(dāng)藻酸鹽≤75 μg/ml時巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力增強(qiáng)，與0μg/ml組相比有顯著差異(P＜0.05)；當(dāng)藻酸鹽＞75 μg/ml時巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力降低，與0μg/ml組相比有顯著差異(P＜0.05)。 結(jié)論：銅綠假單胞菌生物膜可以抑制巨噬細(xì)胞的