異種移植臍帶間充質干細胞治療心肌梗死.pdf

1、目的：探討無呼吸機輔助下正中開胸表面結扎兔冠狀動脈左室支建立心梗模型成功率及二次開胸可行性；觀察間充質干細胞(MSCs)心臟表面注射移植治療兔心肌梗死(MI)的效果。
　　方法：
　　1、建立兔心肌梗死模型：15只成年日本大耳白兔，均在無呼吸機輔助下正中開胸表面結扎冠狀動脈左室支建立心肌梗死模型，以術中肉眼觀變化、建模前后心電圖結合心臟彩超左室縮短分數(LVFS)減少值>5％作為建模成功標準，輔以組織病理學檢測，觀察建模效果

2、；建模后4周末行二次開胸，根據其存活情況判斷是否可行。而后，應用該方法制作20只兔模型備用。
　　2、將20只兔隨機均分為兩組：移植組和對照組。酶消化法分離人臍帶MSCs，擴增培養(yǎng)后調節(jié)濃度為5×106/0.4mL懸液。于兔建模后4周二次開胸時，移植組心臟表面4點注射MSCs懸液共0.4mL，對照組心臟表面4點注射溫生理鹽水共0.4mL。細胞移植后4周觀察心臟彩超LVFS和血流動力學指標，以及病理學改變。
　　結果：

3、　　1、結扎兔冠狀動脈左室支建立MI模型，共成功12只，二次開胸后共存活8只，存活率67％(8/12)。與建模前相比，建模后兔心電圖出現(xiàn)典型動態(tài)變化，LVEDD和LVESD增大，LVFS明顯降低(P<0.05)。二次開胸后心室內徑變化與建模前、建模后均無明顯差別(P>0.05)，但LVFS與建模前差異仍有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；組織病理學HE染色和Masson三色染色顯示，與正常部位心肌組織相比，梗死區(qū)及周邊組織心肌纖維排列紊亂、斷

4、裂或肥大，部分心肌細胞丟失、呈空泡變性，間質水腫，可見少量炎性細胞浸潤。
　　2、分離培養(yǎng)的臍帶MSCs顯示呈梭形貼壁生長，高表達CD105和CD90，大多數不表達CD34和CD45。細胞移植療效：與對照組相比，移植組LVFS明顯升高(P<0.05)，LVSP、LVEDP和-dp/dt max均有明顯變化(P<0.05)。組織病理學HE染色和Masson三色染色顯示移植組梗死區(qū)與正常區(qū)交界處存活細胞增多，且梗死區(qū)外側可見大量紅細胞