遼寧省阜新農(nóng)村地區(qū)高血壓家系流行病學(xué)調(diào)查及黃嘌呤脫氫酶基因與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、心腦血管疾病(Cardiovascular disease，CVD)是目前大多數(shù)國家的主要死亡原因之一?？刂聘哐獕杭捌洳l(fā)癥的發(fā)生，具有重要的意義。
　　在遼寧農(nóng)村地區(qū)37.8％的居民（≥35歲）患有高血壓病，然而全國的患病率（35-74歲）僅為26.1％。遼寧省阜新農(nóng)村地區(qū)是高血壓高發(fā)地區(qū)，農(nóng)村人群同外界接觸少，同時，該地區(qū)居民有相似的生活方式，影響血壓的環(huán)境因素較一致，適合進行高血壓家系人群的流行病學(xué)調(diào)查。代謝異常（血糖異常，

2、血脂異常，超重或肥胖）和高血壓常常同時存在，本研究評價了遼寧農(nóng)村地區(qū)高血壓家系人群的代謝異?；疾∏闆r。
　　目前認為，高血壓是多種遺傳因素和環(huán)境因素以及基因-基因間，基因-環(huán)境間相互作用的結(jié)果。幾乎所有的基因突變均是通過干預(yù)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)或鹽皮質(zhì)激素受體的功能，導(dǎo)致腎臟遠端腎單位對鈉離子的重吸收增加伴水重吸收增加，最終致血壓升高。高尿酸血癥，氧化應(yīng)激參與高血壓及其并發(fā)癥的發(fā)病機制。黃嘌呤脫氫酶(XDH)產(chǎn)生尿酸，并在其氧化酶亞型產(chǎn)生

3、活性氧。本研究針對遼寧農(nóng)村地區(qū)的漢族人群進行流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上，應(yīng)用DNA混合池結(jié)合pyrosequencing方法進一步研究XDH基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)。
　　方法:
　　1.于2008-2009年進行高血壓家系流行病學(xué)調(diào)查，在遼寧阜新農(nóng)村，按不同方位抽取42個村，采取知情同意原則，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)心血管流行病學(xué)調(diào)查方法，采用統(tǒng)一的調(diào)查問卷，對當(dāng)?shù)亍?8歲的漢族高血壓家系人群進行高血壓，代謝異常及相關(guān)因素的橫斷面調(diào)查。對

4、于符合條件的入選者測量血壓、身高、體重，計算體質(zhì)指數(shù)(BMI);采集外周血標(biāo)本，采用常規(guī)臨床方法測定空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、總膽固醇(TC)、總蛋白、白蛋白、血肌酐和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。
　　2.在遼寧阜新農(nóng)村選取祖輩即在此居住的漢族人群進行流行病學(xué)調(diào)查，收集高血壓組500例，入選標(biāo)準(zhǔn):年齡≥18歲，達到高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除繼發(fā)性高血壓，三代以內(nèi)無親緣關(guān)系，均為漢族，無

5、異族通婚史。對照組500例，入選標(biāo)準(zhǔn):年齡≥40歲，收縮壓＜140mmHg和舒張壓＜90mmHg，三代以內(nèi)無親緣關(guān)系，均為漢族，無異族通婚史。對于符合條件的入選者測量身高、體重，計算BMI;采集外周血標(biāo)本，采用常規(guī)臨床方法測定FPG、TG、HDL-C、TC和LDL-C。應(yīng)用試劑盒法提取血液基因組DNA，對于符合OD260/OD280比值在1.65-2.1之間，OD260/OD230比值在1.0-2.5之間，濃度≥10ng/ul標(biāo)準(zhǔn)的個體

6、DNA，每份取100ng，每個DNA pooling中平均混入100份DNA，最后，構(gòu)建高血壓組和對照組各5個DNApooling。在中國北京漢族人群（CHB）中按次要等位基因頻率MAF≥0.1，連鎖不平衡系數(shù)r2≥0.9的設(shè)定，選擇XDH基因的5個標(biāo)簽SNP，rs206811，rs1042039，rs1054889，rs2073316，rs7574920。應(yīng)用Pyrosequencing方法對這5個tagSNP位點進行等位基因分型。<

7、br>　　研究過程中涉及的倫理問題均由中國醫(yī)科大學(xué)倫理委員會審議通過。全部數(shù)據(jù)使用Epidata3.1建立數(shù)據(jù)庫，SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示;計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示;各組率之間比較采用卡方檢驗;利用Logistic多元回歸分析來評價血脂異常同各種因素的關(guān)系。組間等位基因頻率比較采用Fishers確切檢驗，為消除多重比較可能造成的統(tǒng)計學(xué)偏倚，利用Bonferroni法對p值進行校正，Pc＜0.05時認為

8、具有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)果:
　　1.高血壓家系流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果:共收集完整資料，入選合格家系206個，總?cè)藬?shù)1123人（男681人，女442人，其中高血壓913人，非高血壓210人）。家系中高血壓組BMI、 TC、LDL-C、TG、FPG、血肌酐水平、吸煙比例與非高血壓組相比有顯著差異。家系中高血壓患者知曉率、治療率、空腹血糖異常的比例、體質(zhì)指數(shù)、血脂異常比例均高于普通人群。在調(diào)整其他相關(guān)因素后，年齡和BMI是TC和LDL

9、-C共同危險因素;BMI及FPG水平是TC和TG的共同危險因素;飲酒可增加TC患病的危險。
　　2.基因研究結(jié)果:病例組及對照組在年齡和性別構(gòu)成上沒有差別，F(xiàn)BG、TG和HDL-C無顯著性差異，高血壓組BMI、TC和LDL-C水平顯著性高于對照組。未經(jīng)Bonferroni校正時，XDH基因rs206811C等位基因頻率在高血壓組(35.9)顯著性低于對照組(40.6)，p值為0.031; rs1042039T等位基因頻率在高血壓組

10、(33.9)顯著低于對照組(39.4)，p值為0.011; rs1054889 C等位基因頻率在高血壓組(38.8)顯著性低于對照組(44.8)，p值為0.007; rs2073316 C等位基因頻率在高血壓組(29.2)顯著性低于對照組(34.4)，p值為0.013。經(jīng)過Bonferroni校正后，rs1042039，rs1054889，rs2073316這三個位點等位基因頻率在兩組間有顯著性差別p值為分別為0.044，0.035，0