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1、對(duì)于集約化飼養(yǎng)條件下的高產(chǎn)奶牛來說,日糧中的膽堿和奶牛自身合成的膽堿可能難以滿足需要,有必要進(jìn)行外源性添加。膽堿易被瘤胃微生物降解,限制了膽堿在奶牛飼料中的應(yīng)用。針對(duì)這種情況,本研究開發(fā)了一種免于被瘤胃微生物降解的過瘤胃保護(hù)膽堿產(chǎn)品,并將其應(yīng)用于奶業(yè)生產(chǎn)中,包括以下內(nèi)容:膽堿的過瘤胃保護(hù)技術(shù)研究(試驗(yàn)一);膽堿的過瘤胃保護(hù)效果評(píng)定(試驗(yàn)二);過瘤胃保護(hù)膽堿在泌乳奶牛中應(yīng)用效果的研究(試驗(yàn)三);過瘤胃保護(hù)膽堿在圍產(chǎn)期奶牛中應(yīng)用效果的研究(
2、試驗(yàn)四);過瘤胃保護(hù)膽堿和葉酸在圍產(chǎn)期奶牛中應(yīng)用效果的研究(試驗(yàn)五)。
試驗(yàn)一、采用正交設(shè)計(jì)方法,進(jìn)行氯化膽堿的穩(wěn)定保護(hù)技術(shù)研究,研究不同膽堿原料、加工技術(shù)、技術(shù)配方對(duì)保護(hù)效果的影響,以藥物溶出度法進(jìn)行膽堿保護(hù)產(chǎn)品的體外快速初評(píng)。微滾轉(zhuǎn)包衣技術(shù)保護(hù)結(jié)果顯示,以樹脂為主料作為包膜材料,植物載體型和二氧化硅載體型膽堿的保護(hù)率分別在6.5%~7.4%和17.4%~19.2%之間,其中植物載體型膽堿保護(hù)率不隨樹脂水平的增加而提高,
3、硅載體型膽堿則有提高趨勢(shì)。制粒技術(shù)初試結(jié)果顯示,以油脂為主料作為包膜材料,采用制粒技術(shù),一次制粒后植物載體和二氧化硅載體型膽堿的膽堿保護(hù)率分別為41.5%~48.0%和49.6%~64.2%,二次制粒后分別為35.8%~42.9%和43.3%~58.9%,其中植物載體型膽堿保護(hù)率隨油脂濃度的增加而提高,硅載體型膽堿則極顯著下降(p<0.01)。制粒中試結(jié)果顯示,當(dāng)硅載體型膽堿與油脂以高比例混合進(jìn)行一次和二次制粒后,膽堿保護(hù)率分別達(dá)到最大
4、(83.9%和72.9%),一次制粒保護(hù)率高于二次制粒工藝。
試驗(yàn)二、采用飽和吸水率法、體外法、半體內(nèi)法評(píng)價(jià)膽堿的過瘤胃保護(hù)技術(shù)及其保護(hù)效果。飽和吸水率法結(jié)果顯示,未處理膽堿在前10小時(shí)吸水率快速增加(6%),90小時(shí)后達(dá)到最大(約12%)。制粒膽堿產(chǎn)品在前10小時(shí)吸水率較低(2%),90小時(shí)后達(dá)到最大(接近4%)。保護(hù)膽堿在人工唾液中的降解結(jié)果顯示,未處理膽堿2小時(shí)內(nèi)大部分都釋放,其釋放率在90%以上;制粒膽堿產(chǎn)品2小時(shí)
5、內(nèi)釋放10%左右,24小時(shí)釋放率為35%左右。三級(jí)離體消化試驗(yàn)第一階段模擬瘤胃內(nèi)的消化,結(jié)果顯示未處理膽堿2小時(shí)內(nèi)大部分都釋放,釋放率在90%以上;制粒膽堿產(chǎn)品在2小時(shí)內(nèi)釋放20%左右,24小時(shí)釋放率達(dá)到60%左右;利用瘺管湖羊進(jìn)行尼龍袋法評(píng)定,結(jié)果顯示未處理膽堿短時(shí)間內(nèi)消失,消失率在90%以上,制粒膽堿產(chǎn)品在尼龍袋里消化2小時(shí)的消失率低于20%,24小時(shí)后消失率為60%,24小時(shí)的有效釋放率為35.0%。三級(jí)離體消化試驗(yàn)?zāi)M瘤胃后的消
6、化結(jié)果顯示,未處理膽堿2小時(shí)內(nèi)大部分都釋放,釋放率在90%以上;保護(hù)膽堿殘?jiān)?小時(shí)的膽堿消化率略高于制粒膽堿產(chǎn)品,24小時(shí)兩者釋放率都達(dá)到90%,總體上制粒膽堿產(chǎn)品在整個(gè)消化道的釋放率為97.7%,不存在過度保護(hù)。
試驗(yàn)三、研究過瘤胃保護(hù)膽堿在泌乳初期、盛期和中后期荷斯坦奶牛中的應(yīng)用效果。試驗(yàn)三(1):選擇健康非泌乳懷孕經(jīng)產(chǎn)奶牛14頭,以胎次、預(yù)產(chǎn)期、上胎產(chǎn)奶量為基本條件兩兩配對(duì)。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明,過瘤胃保護(hù)膽堿有增加奶產(chǎn)
7、量和4%校正奶產(chǎn)量的趨勢(shì),對(duì)采食量無顯著影響。試驗(yàn)組乳蛋白量、乳脂量和乳糖量均略高于對(duì)照組,而乳蛋白率略低于對(duì)照組。過瘤胃保護(hù)膽堿有增加血漿葡萄糖和降低游離脂肪酸的趨勢(shì),對(duì)血漿天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、極低密度脂蛋白、甘油三酯、膽固醇無影響。試驗(yàn)三(2):選擇健康奶牛48頭,以胎次、泌乳日、產(chǎn)奶量為基本條件進(jìn)行兩兩配對(duì)。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明,過瘤胃保護(hù)膽堿有增加奶產(chǎn)量趨勢(shì),與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組牛群平均頭日奶產(chǎn)量增加1.91kg。試驗(yàn)組
8、乳脂肪率高于對(duì)照組,乳蛋白率基本一致。試驗(yàn)三(3):各選取22頭奶牛,以胎次、泌乳日、產(chǎn)奶量為基本條件進(jìn)行兩兩配對(duì),分別在不同奶牛場(chǎng)進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。奶牛場(chǎng)一的試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,過瘤胃保護(hù)膽堿添加可延緩奶產(chǎn)量下降,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組奶牛平均頭日奶產(chǎn)量增加0.92 kg/d。奶牛場(chǎng)二的試驗(yàn)結(jié)果顯示了與奶牛場(chǎng)一相同的結(jié)果,試驗(yàn)組奶牛平均頭日奶產(chǎn)量增加0.82kg/d。兩個(gè)牛場(chǎng)數(shù)據(jù)結(jié)果均顯示過瘤胃保護(hù)膽堿對(duì)奶成分無顯著影響。
試驗(yàn)四:
9、研究過瘤胃保護(hù)膽堿在圍產(chǎn)期荷斯坦奶牛中的應(yīng)用效果。選取健康非泌乳懷孕奶牛36頭(經(jīng)產(chǎn)奶牛24頭,初產(chǎn)奶牛12頭),按胎次、預(yù)產(chǎn)期、上一胎次產(chǎn)奶量等基本一致的原則隨機(jī)分為4組。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果顯示,過瘤胃保護(hù)膽堿有增加奶產(chǎn)量和4%校正奶產(chǎn)量的趨勢(shì),但不隨添加水平增加而提高,而對(duì)采食量無影響。各組牛乳脂率、乳脂量和乳蛋白量隨添加水平的增加而提高,而乳蛋白率、乳糖、總固形物和無脂固形物差異不顯著。經(jīng)產(chǎn)奶牛結(jié)果表明,過瘤胃保護(hù)膽堿可顯著提高奶產(chǎn)量和
10、4%校正奶產(chǎn)量(p<0.05),各組乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、總固形物率和無脂固形物率及其產(chǎn)量差異不顯著。
與對(duì)照組相比,過瘤胃保護(hù)膽堿有增加血漿葡萄糖和降低游離脂肪酸的趨勢(shì),但未體現(xiàn)出劑量效應(yīng)。血漿丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯和膽固醇等血液指標(biāo)基本不受過瘤胃保護(hù)膽堿添加的影響。綜合過瘤胃保護(hù)膽堿對(duì)奶牛生產(chǎn)性能和血液代謝的影響,以30 g/d的添加水平為佳。
試驗(yàn)五:研究過瘤胃保護(hù)膽堿和葉酸在圍產(chǎn)
11、期荷斯坦奶牛中的應(yīng)用效果。選取健康非泌乳懷孕奶牛60頭,按胎次、預(yù)產(chǎn)期、上一胎次產(chǎn)奶量等基本一致的原則隨機(jī)分為6組。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果顯示:過瘤胃保護(hù)膽堿有增加奶產(chǎn)量和4%校正奶產(chǎn)量的趨勢(shì),葉酸添加組奶牛奶產(chǎn)量略有增加,但各組采食量差異不顯著,膽堿與葉酸未表現(xiàn)出顯著互作。過瘤胃保護(hù)膽堿或葉酸對(duì)乳脂肪、乳糖,總脂率及其產(chǎn)量無顯著影響。過瘤胃保護(hù)膽堿組奶牛乳蛋白率顯著降低(P<0.05),而乳蛋白產(chǎn)量不受影響。
過瘤胃保護(hù)膽堿和葉酸
12、對(duì)血漿丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶和甘油三酯無顯著作用,而過瘤胃保護(hù)膽堿有降低血漿天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶水平的趨勢(shì)。與單飼喂葉酸組牛群相比,過瘤胃保護(hù)氯化膽堿有降低血漿游離脂肪酸的趨勢(shì)。泌乳期持續(xù)可顯著影響肝臟浸潤(rùn)程度(p<0.05),單獨(dú)飼喂葉酸有二組牛群出現(xiàn)了輕度脂肪肝浸澗,當(dāng)與膽堿同時(shí)飼喂有一組發(fā)生輕度脂肪肝浸潤(rùn)。
與單獨(dú)飼喂葉酸組奶牛相比,奶牛飼喂過瘤胃保護(hù)氯化膽堿后,血漿葡萄糖濃度相對(duì)較高,血漿β-羥丁酸水平相對(duì)較低。過瘤胃保護(hù)膽堿和
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