石河子某規(guī)模化豬場仔豬腹瀉病原診斷.pdf

1、2012年1月至6月份期間,新疆石河子周邊某些豬場,2-7日齡哺乳仔豬陸續(xù)發(fā)生嚴重腹瀉,先后死亡仔豬800余頭,發(fā)病率90％,死亡率80%?；疾∽胸i精神沉郁,食欲廢絕,排黃色水樣稀糞,病程3-5d。病理剖解可見:腸系膜充血嚴重,腸系膜淋巴結(jié)腫大,小腸粘膜菲薄,剪開小腸其內(nèi)容物呈黃色且含大量未消化的凝乳塊。根據(jù)臨床癥狀、流行病學(xué)及病理變化初步診斷為大腸桿菌引起的仔豬黃痢;為進一步確診,對送檢病料進行了致病菌的分離、生化鑒定、致病因子和毒力

2、鑒定、病原體的分子生物學(xué)診斷,結(jié)果如下:
　　1.無菌采取病死哺乳仔豬腸內(nèi)容物、腸系膜淋巴結(jié)等病理組織,涂片染色、鏡檢,同時將病料接種于LB肉湯中培養(yǎng),將培養(yǎng)菌分別接種于麥康凱瓊脂平板,兔鮮血瓊脂平板;對分離致病菌進行生化試驗、分子生物學(xué)鑒定、藥物敏感試驗。結(jié)果表明:分離株在麥康凱培養(yǎng)基上呈紅色菌落;可使小白鼠在8h內(nèi)死亡;生化鑒定及PCR鑒定為大腸埃希氏桿菌;分離株大腸桿菌對頭孢菌素類和β-內(nèi)酰胺類藥物敏感。
　　2.通過

3、PCR法和甘露糖血凝MRHA試驗檢測大腸桿菌的菌毛粘附素類型,采用兔回腸結(jié)扎試驗檢測不耐熱腸毒素 LT,運用乳鼠胃內(nèi)注射試驗檢測耐熱腸毒素 STa。PCR和 MRHA結(jié)果表明本試驗分離的大腸桿菌致病因子為987P,兔回腸結(jié)扎試驗未檢測到 LT,乳鼠胃內(nèi)注射試驗未檢測到 STa。將致病大腸桿菌培養(yǎng)液100℃煮沸30min,取0.5mL注射給小白鼠,小白鼠在8h內(nèi)死亡,表明分離株致病大腸桿菌可能有其它種類的耐熱腸毒素。
　　3.用 R

4、T-PCR法檢測病死仔豬腸內(nèi)容物中豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬流行性腹瀉病毒(PEDV),結(jié)果僅檢測到 PEDV,將 PEDV的 M基因和 N基因與不同來源的 PEDV毒株進行比較分析,結(jié)果顯示本試驗檢測到的 PEDV M基因與其他已發(fā)表的PEDV毒株M基因同源性為97.9-99.7%,N基因同源性為95.1%-96.4%;試驗檢測的PEDV的M基因與國內(nèi)分離的CH-SC2-2012在同一分支上;PEDV的N基因與國內(nèi)分離的 YT