功能磁性納米顆粒在原發(fā)性高血壓易感性研究中的應(yīng)用.pdf

1、研究復(fù)雜疾病背后的遺傳作用有助于有效藥物的開發(fā)。原發(fā)性高血壓是最常見的心血管疾病，其發(fā)病率逐年上升，是遺傳因素與環(huán)境因素綜合作用的結(jié)果，原發(fā)性高血壓呈家族聚集現(xiàn)象進(jìn)一步說明遺傳基因的存在。而腎素-血管緊張素系統(tǒng)(Renin-angitensin System，RAS)基因群中血管緊張素原(Angiotensinogen AGT)基因與原發(fā)性高血壓(Essential Hypertension EH)相關(guān)性的研究成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。

2、>　　為了進(jìn)一步揭示 AGT基因與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性，我們對(duì)AGT基因兩個(gè)多態(tài)位點(diǎn)：M235T位點(diǎn)和A-6G位點(diǎn)與湖南地區(qū)原發(fā)性高血壓的易感相關(guān)性進(jìn)行了研究。
　　我們制備了平均粒徑為30 nm的γ-Fe2O3顆粒，顆粒的飽和磁化強(qiáng)度為48.4 emu/g，具有超順磁性，并對(duì)其進(jìn)行了鏈霉親和素修飾，實(shí)驗(yàn)證明鏈霉親和素修飾的γ-Fe2O3磁性顆粒具有很好的生物活性，可以進(jìn)一步用于生物檢測(cè)。利用生物素與鏈霉親和素系統(tǒng)的超強(qiáng)特異結(jié)合作

3、用，將鏈霉親和素修飾的γ-Fe2O3磁性顆粒應(yīng)用于下一步SNP分型檢測(cè)中。本文中，我們收集了湖南地區(qū)243例原發(fā)性高血壓樣本，247例正常對(duì)照樣本，并對(duì)血管緊張素原基因中的兩個(gè)最受關(guān)注的位點(diǎn)M235T位點(diǎn)和A-6G位點(diǎn)進(jìn)行易感性研究。首先擴(kuò)增生物素標(biāo)記的PCR產(chǎn)物，將其固定于鏈霉親和素標(biāo)記的磁性納米顆粒上，然后與雙色熒光標(biāo)記（Cy3和Cy5）的等位基因特異性探針進(jìn)行雜交；最后通過掃描以獲得樣本的基因型。利用該方法，我們成功地對(duì)來自243

4、個(gè)高血壓及正常樣本的2個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行了分型，對(duì)于純合型樣本，其正錯(cuò)配信號(hào)強(qiáng)度比均大于3，雜合型樣本其Cy3：Cy5信號(hào)強(qiáng)度比介于0.64和1.7之間，分型方法經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證。
　　通過用SPSS13.0分析軟件對(duì)分型結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)原發(fā)性高血壓病例組血管緊張素原基因M235T位點(diǎn)CC，CT，TT基因型頻率與正常對(duì)照組比較差異有顯著性意義(χ2=5.532，P=0.063)；C，T等位基因頻率與正常對(duì)照組比較差異有顯著性意義(χ2=