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文檔簡介
1、當(dāng)前,在農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)中,尤其是蔬菜、水果生產(chǎn)的過程中,噴灑化學(xué)農(nóng)藥還是必要的手段。目前普遍使用的農(nóng)藥主要是有機磷,氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯等三大類,擬除蟲菊酯的毒性相對較低。當(dāng)前對人畜造成危害,引起人們中毒的主要還是前兩類農(nóng)藥,并且有研究表明:某些有機磷農(nóng)藥對動物有致畸性和致癌性。因此,對瓜果蔬菜進行農(nóng)藥殘留的測定有很重要的意義。目前,常用的農(nóng)藥殘留的檢測方法主要是氣相色譜法,液相色譜法和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法,但是這些方法對儀器設(shè)備的性能和操作
2、人員的素質(zhì)有較高的要求。而且由于瓜果蔬菜的特殊性,其從采摘到上市時間較短,要在這么短的時間內(nèi)了解瓜果蔬菜上農(nóng)藥殘留的污染狀況,就需要采用快速測定法。 本文在以下三個方面進行了研究:(1)闡述有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥如何對乙酰膽堿酯酶的活性進行抑制;(2)實驗條件的優(yōu)化,由于膽堿酯酶的活性受諸多因素的影響,如濃度,pH值,反應(yīng)時間等,我們對實驗pH、實驗溫度、反應(yīng)時間等實驗條件進行優(yōu)化,確定最佳分析條件。(3)對建立的方法進行方法
3、學(xué)驗證,繪制辛硫磷、三唑磷、毒死蜱、滅多威、異丙威、仲丁威、速滅威、甲萘威等農(nóng)藥的測定標(biāo)準(zhǔn)曲線。做各自的精密度實驗和準(zhǔn)確度實驗。 論文主要工作如下: 一、闡述有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶的活性的抑制的原理 乙酰膽堿酯酶(AChE)上有有機磷與氨基甲酸酯類化合物的作用位點,當(dāng)這兩類化合物與AChE結(jié)合后,會造成酶催化部位的磷?;c氨基甲酰化,使其對乙酰化作用無法進行,從而破壞了正常的神經(jīng)傳導(dǎo)作用。
4、 二、生化分析儀測定膽堿酯酶的條件優(yōu)化 對實驗pH、實驗溫度、反應(yīng)時間等實驗條件進行優(yōu)化,從而確定最佳分析條件。由于有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥主要是有機合成殺蟲劑,采用甲醇作為溶劑既能很好的溶解待測農(nóng)藥,而且也不會明顯的抑制膽堿酯酶的活性,完全能夠滿足實驗的需要。在測定時我們只取了3μL的樣品提取液與血清中膽堿酯酶反應(yīng),使樣品提取液的體積只占反應(yīng)體積的1/100左右,同時也最大程度地避免了甲醇對測定的干擾。通過實驗還得到反應(yīng)的最佳
5、條件:實驗pH:7.5,實驗溫度:37℃;反應(yīng)時間:5分鐘。 三、生化分析儀快速測定農(nóng)藥的方法學(xué)驗證 作出辛硫磷、三唑磷、毒死蜱、滅多威、異丙威、仲丁威、速滅威、甲萘威等農(nóng)藥的測定標(biāo)準(zhǔn)曲線,相關(guān)系數(shù)分別為:0.999、0.995、0.999、0.997、0.995、0.995、0.999、0.997。同時還分別得到了各種農(nóng)藥測定方法的最低檢測限、精密度和準(zhǔn)確度,均滿足測定的要求。 本法具有操作簡便、準(zhǔn)確、靈敏、重
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