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1、目的:探討冠心病易感基因Poly-miRTS的分布頻率以及對(duì)不同基因型的調(diào)控作用,探討朝鮮族冠心病高發(fā)的原因,為早期篩選冠心病高危人群、一級(jí)預(yù)防以及早期臨床干預(yù)等提供理論基礎(chǔ)。
方法:本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象是延邊地區(qū)朝鮮族和漢族冠心病患者各250名,正常人各250名,共1000名。(1)主要利用PCR-RFLP方法進(jìn)行基因分型。(2)PCR擴(kuò)增3′UTR基因組DNA,利用限制性內(nèi)切酶切斷PCR產(chǎn)物及pGL3系列的質(zhì)粒,利用T4連接酶連
2、接兩種DNA,制備pGL3-3′UTR系列的質(zhì)粒,在E.coli中大量培養(yǎng)后與miRNA表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染給人平滑肌細(xì)胞株培養(yǎng),進(jìn)行熒光素酶檢測(cè)。
結(jié)果:本病例對(duì)照研究結(jié)果顯示冠心病易感基因的12個(gè)Poly-miRTS中NAMPT-rs1065322(p=0.003)、ABCA1-rs4149341(p=0.0007)和CDKN2B-rs1063192(p=0.018)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而熒光素酶檢測(cè)結(jié)果顯示只有rs4149341有顯
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