靈芝誘變及新舊菌株液體發(fā)酵米糠麩皮的研究.pdf

1、靈芝是研究比較多的珍稀藥食兩用菌之一，其多糖、萜烯類物質(zhì)具有明顯的生物活性，諸如保護(hù)肝臟、治療糖尿病、治療心血管、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫等。本研究在課題組前人研究的基礎(chǔ)上，首次將液體發(fā)酵的發(fā)酵培養(yǎng)基成分和發(fā)酵條件一同納入試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素進(jìn)行考慮，探索了以靈芝Ganoderma lucidum CCTCCM2013287為發(fā)酵菌種的一種較優(yōu)的發(fā)酵方法，并且對靈芝Ganoderma lucidumCCTCCM2013287菌種進(jìn)行了紫外誘變和微波誘變

2、得到了兩株更優(yōu)的高產(chǎn)菌株灰樹花Ganoderma sp.JSUJIN-UV01和Ganoderma sp.JSUJIN-MW01，探索了新菌株Ganoderma sp.JSUJIN-MW01發(fā)酵培養(yǎng)基成分，為工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論上指導(dǎo)。
　　本研究的主要內(nèi)容和結(jié)論如下:
　　(1)通過對靈芝Ganoderma lucidum CCTCC M2013287米糠麩皮的七因素均勻試驗(yàn)探索，確定了:pH值、菌絲濕重、菌絲干重、殘?jiān)?/p>

3、、干物質(zhì)重、菌絲多糖、胞外多糖、米糠麩皮消耗量、以及原料失重的回歸方程，并得出了:
　　①菌絲體最佳生產(chǎn)條件為:米糠為8g/100mL，麩皮為8g/100mL，磷酸二氫鉀為0.137g/100mL，硫酸鎂為0.138g/100mL，轉(zhuǎn)速為134.4r/min，溫度為31.9℃，發(fā)酵時(shí)間為8.36d，得到最大菌絲干重為7.4194g/100mL。
　　②菌絲多糖最佳生產(chǎn)條件為:米糠為8g/100mL，麩皮為8g/100mL，磷

4、酸二氫鉀為0.0001g/100mL，硫酸鎂為0.106g/100mL，轉(zhuǎn)速為134.4r/min，溫度為31.9℃，發(fā)酵時(shí)間為5.78d，得到最大胞內(nèi)多糖為450.966mg/100mL。
　　(2)利用菌絲干重回歸方程預(yù)測0.5～8.5內(nèi)各個(gè)點(diǎn)干重濃度預(yù)測值，并以此建立logistic方程;將經(jīng)驗(yàn)動力學(xué)方程與logistic方程進(jìn)行擬合，發(fā)現(xiàn)擬合較好。此方程適用于菌株生長動力學(xué)模型的建立。
　　(3)測出了靈芝Ganod

5、erma lucidum CCTCC M2013287紫外誘變和微波誘變的劑量曲線，最佳誘變時(shí)間分別為90s和20s，致死率分別為90.12％和89.81％。經(jīng)過十代誘變，5次傳代，篩選出3株生長快速且穩(wěn)定的變異菌株3號、7號、8號。并對篩選出的3株菌株進(jìn)行了發(fā)酵高產(chǎn)試驗(yàn)，綜合對比選出較優(yōu)變異菌株3號和7號。拮抗現(xiàn)象顯示，誘變菌株遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化，并將變異菌株命名為靈芝新菌株Ganoderma sp.JSUJIN-UV01和Ganod

6、erma sp.JSUJIN-MW01。
　　(4)對靈芝新菌株Ganoderma sp.JSUJIN-MW01米糠麩皮發(fā)酵培養(yǎng)基的均勻試驗(yàn)探索，確定了菌絲干重、菌絲多糖的回歸方程，并得出了:
　?、倬z體最佳生長條件為:米糠為5g/100mL，麩皮5g/100mL，磷酸二氫鉀0.2 g/100mL，硫酸鎂0.2g/100mL，轉(zhuǎn)速150r/min，溫度28℃，發(fā)酵時(shí)間5.5d，得到最大菌絲干重6.472g/100mL。此時(shí)

7、胞內(nèi)多糖為718.09mg/100mL。
　?、诰z多糖最佳富集條件為:米糠為5g/100mL，麩皮為5g/100mL，磷酸二氫鉀為0.2g/100mL，硫酸鎂為0.2g/100mL，轉(zhuǎn)速為150r/min，溫度為28℃，發(fā)酵時(shí)間為5.5d，得到最大胞內(nèi)多糖為718.09mg/100mL。此時(shí)菌絲干重為6.472g/100mL。
　　③對比原始菌株菌絲干重濃度和菌絲多糖產(chǎn)量，在同一條件下分別增加了52％和104％。