間尼索地平胃內(nèi)滯留型緩釋片的研制.pdf

1、目的：間尼索地平(m-Nisoldipine，m-Nis)是河北醫(yī)科大學(xué)率先研制開發(fā)的新型二氫吡啶類鈣拮抗劑，初步試驗表明，其光穩(wěn)定性明顯優(yōu)于尼索地平等同類藥物，藥理作用與尼索地平相似。二者對心血管的作用相比，間尼索地平更有優(yōu)越性，對心臟的抑制較弱，副作用較小，降壓作用較迅速等，且毒性很小。間尼索地平在水中溶解度很小，幾乎不溶于水。因此有必要將其制成胃內(nèi)滯留漂緩釋片，以增加藥物吸收，穩(wěn)定血藥濃度，降低毒副反應(yīng)和提高生物利用度，為臨床研究

2、及應(yīng)用提供一種很有前景的緩釋劑型。 方法：在大量文獻資料和預(yù)實驗的基礎(chǔ)上，以不同比例的阻滯劑硬脂酸和致孔劑聚乙二醇-6000(PEG-6000)與Dip制成固體分散體(m-Nis-SD)，并采用差示掃描量熱法(DSC)驗證固體分散體的形成。確定選用羥丙甲基纖維素(HPMC)為親水凝膠骨架材料，加入助漂劑十八醇，發(fā)泡劑碳酸鎂(MgCO3)，和Dip-SD以不同條件制備漂浮型緩釋片，考慮片劑漂浮性能的同時，進行影響藥物釋放速率的單因

3、素考察，確定影響胃漂浮制劑中藥物釋放的主要因素為工藝因素(片劑硬度，干法和濕法，顆粒大小)和上述幾種處方因素。選取合適的制備工藝，以HPMC，聚乙二醇-6000，十八醇，碳酸鎂進行四因素三水平的正交設(shè)計，綜合評價片劑釋放度和漂浮性能，通過極差分析，確定優(yōu)化處方組成。 間尼索地平胃漂浮型緩釋片的釋放度測定方法，根據(jù)2000版中國藥典溶出實驗轉(zhuǎn)籃法要求，以900m10.1mol·l-1。HCL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100r·min-1，

4、溫度37±0.5℃，分別在0.5，1，2，3，4，5，6，7，8，10，12h取樣5ml濾過，隨即補充等溫等體積的空白介質(zhì)，取續(xù)濾液，照分光光度法在237nm波長下測定吸收度A值，根據(jù)標準曲線方程計算藥物濃度，求得間尼索地平胃內(nèi)滯留漂浮型緩釋片的累計釋放百分率。同法考察自制間尼索地平普通片釋放度。以優(yōu)化處方制備三批胃漂浮片，進行含量測定和溶出度試驗，考察制備工藝穩(wěn)定性，并將溶出數(shù)據(jù)分別用Higuchi模型，零級方程和一級方程進行擬合。將

5、自制的間尼索地平胃內(nèi)滯留型緩釋片(Dip-HBS)進行高濕度、高溫和強光照射下的穩(wěn)定性考察，以及密封自然放置條件下分別于制備后一個月、兩個月、三個月和六個月時測定其漂浮性能和體外累計釋放百分率，考察其穩(wěn)定性。漂浮性能考察：于37±0.5℃的以0.2％十二烷基硫酸鈉的人工胃液中，分別采用攪拌槳轉(zhuǎn)速為50r·min-1及轉(zhuǎn)籃法轉(zhuǎn)速為100r·min-1，模擬胃的蠕動，考察自制的間尼索地平胃內(nèi)漂浮緩釋片的形態(tài)變化，起漂時間和持漂時間。同時采用

6、自制的浮力測定儀對m-Nis-HBS體外漂浮力進行測定，并同法考察間尼索地平普通片漂浮性能作對比。 胃內(nèi)滯留性試驗：家兔口飼m-Nis-HBS和普通片后，分別于不同時間處死一只，解剖動物胃腸道，觀察片劑所在部位及形態(tài)。 體內(nèi)釋藥特性的研究(以家兔為實驗動物)：12只分兩組(每組6只)研究m-Nis-HBS和對照普通速釋片的體內(nèi)藥物動力學(xué)過程，給藥后于不同時間點經(jīng)家兔耳緣靜脈取血樣，以桂利嗪為內(nèi)標物經(jīng)過預(yù)處理后，采用簡便、

7、快速、靈敏的反相高效液相色譜法，測定血漿中間尼索地平的濃度。測定結(jié)果用3P97藥代動力學(xué)程序進行處理，模擬藥時曲線，并計算各項藥代動力學(xué)參數(shù)。以Tmax、Cmax和AUC為指標，綜合評價m-Nis-HBS和m-Nis普通片的相對生物利用度。同時以m-Nis-HBS不同時間的體內(nèi)吸收分數(shù)Fa對其相應(yīng)時間的體外釋放百分率Fr進行回歸，求回歸直線方程和相關(guān)系數(shù)，考察m-Nis-HBS的體內(nèi)吸收與體外釋放的相關(guān)性。 結(jié)果：通過DSC，證

8、明了m-Nis以非晶態(tài)分散于載體中，形成了固體分散體。單因素考察確定的制備工藝為：以75％乙醇為潤濕劑，采用濕法制粒壓片法制備m-Nis-HBS片，確定了處方各主要因素用量的水平。通過L9(34)正交實驗設(shè)計得到優(yōu)化處方為A2B2C1D1，HPMC45mg，硬脂酸-PEG-6000-m-Nis(20:10:5)SD 35mg，十八醇10mg，MgCO310mg，根據(jù)極差大小可知，各因素對藥物釋放性能和漂浮性能的影響程度為C>A>B>D。

9、制得的片劑表面光潔圓整，外觀較好，硬度為4～5kg。處方中HPMC遇水膨脹形成凝膠屏障，阻止內(nèi)部片心進一步水化，可控制藥物釋放；硬脂酸和PEG6000作為載體制成固體分散體，可使間尼索地平均勻分散，調(diào)節(jié)藥物釋放。十八醇為助漂劑和輔助阻滯劑，MgCO3為發(fā)泡劑，均可顯著提高片劑漂浮性能。根據(jù)優(yōu)化處方制備了三批片劑，同一批6片取樣時間點具均一性，三批片劑藥物釋放具有重現(xiàn)性，說明制備工藝穩(wěn)定。將本品釋放曲線分別用零級方程、Higuchi模型、

10、一級方程進行擬合，回歸方程分別為： Ft=7.401t+15.33，r=0.9865Ft=31.54t1/2-13.09，r=0.9955 log(Fa-Ft)=-0.1033t+2.087，r=-0.9766說明釋藥特性更符Higuchi模型，m-Nis-HBS片具有明顯的緩釋特征。釋放度數(shù)據(jù)以Peppas方程進行擬合，釋放機制為藥物的擴散和骨架溶蝕協(xié)同作用。高溫、高濕度、強光影響因素實驗結(jié)果表明：m-Nis-HBS片對三者均

11、不穩(wěn)定，但含量下降均在5％以下，且片劑在RH75％10d的吸濕增重小于5％，均符合藥典規(guī)定。以處方量80％、100％、120％的間尼索地平及相應(yīng)輔料進行了回收率實驗，回收率分別為：(99.32±0.57)％，(99.61±0.41)％，(99.91±0.28)％(n=3)。三批片劑含量測定結(jié)果為：(101.3±0.59)％，(99.59±0.66)％，(102.6±0.25)％(n=3)，且含量均勻度合格。漂浮性能考察結(jié)果：于37±0.

12、5℃的含0.2％十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液人工胃液中，在攪拌槳轉(zhuǎn)速為50r·min-1情況下及采用轉(zhuǎn)籃法(100rmin)，自制的m-Nis-HBS均在3min內(nèi)起漂且可持續(xù)漂浮12h以上。而間尼索地平普通片5min內(nèi)即全部崩散下沉。對m-Nis-HBS體外漂浮力進行測定，凈浮力最高達210mg，2h～6h之間凈浮力近似為一平臺期，6h后凈浮力呈線性下降：f=31.36-0.1317t(6h≤t≤30h)，r=-0.9945。 通

13、過家兔在體的胃內(nèi)滯留性試驗，表明m-Nis-HBS 6h以后仍在胃部，已脹大且片型完整，胃內(nèi)滯留時間明顯延長。 根據(jù)家兔體內(nèi)m-Nis-HBS片和對照普通速釋片的體內(nèi)藥物動力學(xué)過程的研究結(jié)果，計算各項藥動學(xué)參數(shù)。m-Nis-HBS和m-Nis藥動學(xué)參數(shù)分別為： Tlag：0.06636±0.1022，0±Oh； T1/2(Ke)：6.637±1.801，2.721±0.8492hT1/2(Ka)：1.610±0.3391

14、，0.6390±0.3003hTmax：6.380±0.7540，2.325±0.8179hCmax：79.67±23.42，119.7±26.55ng·ml-2AUC：1303±309.4，784.6±204.5(ng·ml-1)·hMRT：14.93±2.884，6.088±2.328h二者體內(nèi)過程均符合一級動力學(xué)一室模型。各項參數(shù)經(jīng)配對t檢驗表明：延遲釋放時間Tlag和消除速度常數(shù)Ke沒有顯著性差異(P>0.05)；消除半衰期T1

15、/2(Ke)，吸收半衰期T1/2(Ka)、峰濃度Cmax、達峰時間Tmax、藥-時曲線下面積AUC均有顯著性差異(p<0.05)，說明m-Nis-HBS漂浮緩釋片在家兔體內(nèi)具有明顯的緩釋制劑特征。以Tmax、Cmax和AUC為指標，綜合評價m-Nis-HBS和m-Nis普通片的相對生物利用度。以m-Nis-HBS不同時間的體外釋放百分率Fr對其體內(nèi)的吸收分數(shù)Fa進行回歸，得直線方程：Fa=0.9078Fr-7.999，r=0.9932，