胃腸道間質(zhì)瘤區(qū)域性基因突變類型及預(yù)后的差異性分析.pdf

1、目的：
　　通過對東北地區(qū)胃腸道間質(zhì)瘤(GIST)區(qū)域性基因突變類型的回顧分析，研究胃腸道間質(zhì)瘤區(qū)域性基因突變類型的特點，并對不同基因突變類型患者的預(yù)后結(jié)果進行隨訪觀察，分析不同基因突變類型的預(yù)后差異性，旨在提高GIST區(qū)域性基因突變的防治，改善GIST預(yù)后不良的現(xiàn)象。
　　方法：
　　收集2012年9月至2013年11月遼寧省腫瘤醫(yī)院病理科胃腸道間質(zhì)瘤(GIST)存檔標本、新鮮標本及門診GIST患者共80例作為研究對

2、象。對標本進行免疫組化處理，采用4％的甲醛溶液固定石蠟包埋標本，采用5種免疫組化學(xué)抗體進行標記并進一步診斷，主要包括CD117(A4502，多抗1B200)，CD34(M7165，1B50)，S-100(Z231，1B200)，平滑肌肌動蛋白(SMA，M851，1B100)，結(jié)蛋白(M760，1B100)，其中CD11抗體與DOG-1抗體用EnVision兩步法，其余抗體均用SP三步法。CD117以腫瘤細胞胞膜呈棕黃色為陽性，以黏膜內(nèi)的

3、肥大細胞作為陽性內(nèi)對照。S-100為胞核和胞質(zhì)著色，其余均為胞質(zhì)著色;診斷標準:常規(guī)形態(tài)符合GIST診斷要點，免疫組織化學(xué)80例因CD117陽性而診斷:其中150例胞膜彌漫陽性，5例因胞膜弱陽性、胞質(zhì)高爾基體區(qū)陽性而診斷;10例CD117陰性者中有4例CD34陽性而診斷，另6例因SMA、結(jié)蛋白和S-100均陰性，排除了平滑肌源性和神經(jīng)源性腫瘤，病理組織學(xué)形態(tài)符合GIST而納入本研究;c-Kit和PDGFRA基因突變分析:用DNA提取試劑

4、盒(Qiagen公司)提取7例新鮮組織和158例石蠟包埋組織的DNA，行PCR擴增。
　　結(jié)果：
　　東北地區(qū)GIST患者80例中共檢出c-Kit基因突變51例，構(gòu)成比為63.75％，其中11號外顯子突變?yōu)?5例，占所有突變88.24％，9號外顯子突變3例，突變率為5.88％;13號外顯子突變1例，突變綠為1.96％。PDGFRA基因突變檢測5例，突變率為9.80％。c-Kit與PDGFRA基因突變率比較存在顯著差異，P＜0

5、.05，具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　56例基因突變GIST患者中53例為復(fù)合性突變，3例為單純性突變，其中11號外顯子突變方式以點突變最常見，其次為缺失突變20例占35.71％(20/56)和插入突變7例占12.50％(7/56)。突變位點多集中在5-端的經(jīng)典熱區(qū)，其次為3-端的框內(nèi)串聯(lián)重復(fù)。
　　比較東北地區(qū)GIST患者的基因突變率在不同組別中的差異（腫瘤原發(fā)部位、年齡、性別、腫瘤大小、細胞形態(tài)、核分裂、惡性潛能分級）。胃GIS

6、T的總突變率及c-Kit外顯子11突變率較其他部位GIST高，差異具有顯著性差異性。GIST的基因突變率及突變方式與年齡、性別、腫瘤大小、核分裂、惡性潛能分級等均無顯著性關(guān)系，并且與預(yù)后無明顯關(guān)系。
　　結(jié)論：
　　中國東北地區(qū)GIST基因突變類型與世界突變類型相同。GIST患者中有近70％為c-Kit突變，PDGFRA也出現(xiàn)在約5％-10％的患者中。c-Kit基因突變主要集中在第11號外顯子。突變的方式頻率主要以點突變、缺