蜂產(chǎn)品中生物堿的分布與變化規(guī)律研究.pdf

1、技術(shù)性貿(mào)易壁壘已成為世界各國出口貿(mào)易發(fā)展的主要障礙。近些年來，隨著世界范圍內(nèi)蜂產(chǎn)品中生物堿檢出事件的頻頻曝光，蜂產(chǎn)品中新興的質(zhì)量安全風(fēng)險因子—生物堿成為了新的研究熱點。但我國還尚未對國內(nèi)蜂產(chǎn)品市場（包括國內(nèi)生產(chǎn)的蜂產(chǎn)品以及進(jìn)口蜂產(chǎn)品）進(jìn)行生物堿的風(fēng)險評估以及監(jiān)督預(yù)警。因此，國內(nèi)消費者可能面臨生物堿潛在的健康威脅，蜂產(chǎn)品的出口貿(mào)易也存在潛在的貿(mào)易壁壘制約。本研究的目的是建立蜂產(chǎn)品中（蜂蜜和蜂花粉）生物堿（吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿）

2、的快速、可靠的分析方法，并對我國含有吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿的蜜源植物分布規(guī)律進(jìn)行初步探索，之后對吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿在蜂蜜采收后存放、加工和貯藏過程中的變化規(guī)律進(jìn)行研究。以此來為國內(nèi)蜂產(chǎn)品市場中的生物堿的監(jiān)測預(yù)警提供理論依據(jù)，規(guī)范蜂產(chǎn)品市場，滿足人們食用優(yōu)質(zhì)和安全的蜂產(chǎn)品需求，并有利于積極應(yīng)對和破除發(fā)達(dá)國家設(shè)置的技術(shù)壁壘。
　　本研究主要分為三個部分，第一部分分別建立了測定蜂蜜和蜂花粉中的吡咯里西啶生物堿和異

3、喹啉類生物堿的分散固相萃取-高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(QuEChERS-HPLC-MS/MS)。測定吡咯里西啶生物堿時，樣品經(jīng)Zn粉還原，乙腈提取，乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)吸附劑凈化，HPLC-MS/MS測定;測定異喹啉生物堿時無需還原步驟，提取液直接進(jìn)行分散固相萃取，凈化，上機測定。結(jié)果表明:在0.1-100μg/L范圍內(nèi)，10種生物堿的相關(guān)系數(shù)(R2)均大于0.99;在1-100μg/kg的添加水平下，所有生物堿的基質(zhì)回收率均

4、在70％-110％之間;10種生物堿日內(nèi)精密度小于15％，日間精密度小于20％;方法檢出限和定量限分別為0.3μg/kg和1.0μg/kg。本方法定性定量快速準(zhǔn)確，穩(wěn)定可靠，可用于蜂產(chǎn)品中吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿的定性定量分析。
　　第二部分對國內(nèi)主要市售品種的蜂蜜和蜂花粉以及國外主要市售蜂蜜品種進(jìn)行吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿的分析測定。結(jié)果顯示:國內(nèi)的蜂蜜和蜂花粉中的兩類生物堿檢出率和檢出含量較低，而進(jìn)口蜂蜜的檢出

5、率和含量明顯高于國內(nèi)蜂蜜，并且主要是石松胺和藍(lán)薊定生物堿檢出，檢出率為分別54％，40％，且最高檢出含量分別為177.0μg/kg和177.6μg/kg;進(jìn)口蜂蜜同一樣品中會有多種吡咯里西啶生物堿的存在，最多達(dá)4種;計算各生物堿的總和可知，進(jìn)口蜂蜜樣品中的吡咯里西啶生物堿最高含量達(dá)226.1μg/kg;從蜜種來看，麥盧卡蜂蜜和雜花蜜檢出率較高;從產(chǎn)地來看，新西蘭的吡咯里西啶生物堿含量較高。實驗證明了國內(nèi)蜂蜜和蜂花粉檢出風(fēng)險較小，消費者食

6、用也更為健康和安全。而進(jìn)口蜂蜜檢出風(fēng)險較大，有必要對其進(jìn)行監(jiān)督和預(yù)警。
　　第三部分對蜂蜜采收后露天存放、加工和貯藏等3個環(huán)節(jié)的溫度和時間兩個因素進(jìn)行吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿的變化規(guī)律研究。研究結(jié)果表明，兩類生物堿在40℃露天存放12周內(nèi)濃度基本沒變化，在50℃加工12小時內(nèi)含量也無明顯降低，在25℃貯藏6個月內(nèi)含量仍無明顯降低，說明吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿在上述3個環(huán)節(jié)中非常穩(wěn)定，很難降解。因此，對于檢出風(fēng)險高的