細(xì)鱗裂腹魚(yú)生殖生物學(xué)研究.pdf

1、細(xì)鱗裂腹魚(yú)(Schizothorax chongi)隸屬于鯉科(Cyprinidae)裂腹魚(yú)亞科(Schizothoracinae)，是產(chǎn)區(qū)的名貴魚(yú)類(lèi)，也是中國(guó)特有的重要冷水性經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)。本研究以細(xì)鱗裂腹魚(yú)為試驗(yàn)材料．研究了性腺發(fā)育成熟過(guò)程中各組織中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的積累和轉(zhuǎn)化及其相關(guān)酶活性的變化規(guī)律；通過(guò)組織切片和透射電鏡技術(shù)對(duì)細(xì)鱗裂腹魚(yú)性腺發(fā)育的顯微和超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀測(cè)；還對(duì)其人工繁育技術(shù)和胚胎發(fā)育特點(diǎn)進(jìn)行了探討。1細(xì)鱗裂腹魚(yú)性腺成熟過(guò)程中體

2、內(nèi)的生化組成和相關(guān)酶活性測(cè)定雌雄細(xì)鱗裂腹魚(yú)的性腺系數(shù)(GSI)均隨性腺的成熟而逐漸升高，到第Ⅴ期達(dá)到最大值，分別為8.78±3.93和5.54±2.03；雄魚(yú)的肝胰臟系數(shù)(HSI)在第Ⅴ期最高，為2.13±0.22；而雌魚(yú)性腺的脂肪系數(shù)(CF)則在第Ⅳ<'+>期到達(dá)峰值14.61±3.44。 對(duì)性腺發(fā)育成熟過(guò)程中肌肉、肝胰臟、性腺和血液中各項(xiàng)生理生化指標(biāo)的檢測(cè)表明：水分在各時(shí)期各組織中的變化較??；肌糖原隨性腺成熟變化小，而肝糖原

3、和血糖則呈現(xiàn)劇烈的變化；卵巢在發(fā)育的早期，對(duì)蛋白質(zhì)的需求較大，而對(duì)脂類(lèi)物質(zhì)的需求不高，該期卵巢積累的蛋白質(zhì)和脂類(lèi)均來(lái)源于體內(nèi)的其他組織；卵巢成熟后期對(duì)蛋白質(zhì)的需求減少，但對(duì)脂類(lèi)的需求急劇增加，在此階段脂質(zhì)主要是靠?jī)?nèi)源供應(yīng)。 精巢中乳酸脫氫酶(LDH)活性與其精子成熟的代謝密切相關(guān)，并隨精子的成熟而升高；性腺中的脂肪酶(LPS)活性也隨性腺發(fā)育成熟而逐漸升高；一氧化氮合酶(NOS)活性在性腺成熟前的各組織中均以“脈沖”的方式表達(dá)，

4、可能是一種生殖信號(hào)。2細(xì)鱗裂腹魚(yú)性腺發(fā)育的顯微和超微結(jié)構(gòu)研究系統(tǒng)地描述了各期精、卵巢的形態(tài)結(jié)構(gòu)和各時(shí)相生殖細(xì)胞的顯微和超微結(jié)構(gòu)特征。將精、卵巢的發(fā)育都分為6個(gè)時(shí)期，相應(yīng)的卵母細(xì)胞發(fā)育分為6個(gè)時(shí)相，生精細(xì)胞發(fā)育經(jīng)歷了初級(jí)精原細(xì)胞、次級(jí)精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞、精子細(xì)胞和成熟精子幾個(gè)階段。 細(xì)鱗裂腹魚(yú)精巢屬于小葉型。精小葉邊緣有各種非生殖細(xì)胞分布，包括支持細(xì)胞、邊界細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞，各類(lèi)生精細(xì)胞位于精小葉中部。

5、初級(jí)精原細(xì)胞和次級(jí)精原細(xì)胞在精巢中的分布區(qū)域，細(xì)胞大小，細(xì)胞器種類(lèi)和數(shù)量的分布上有諸多不同。擬染色體在除精子以外的各期生殖細(xì)胞中存在。核泡是在精子細(xì)胞形成的過(guò)程中產(chǎn)生的，并隨著精子的成熟而消失。成熟精子頭部無(wú)頂體，主要為核占據(jù)，尾部細(xì)長(zhǎng)，主要由軸絲組成，呈"9+2"結(jié)構(gòu)。卵巢是由生殖脊包裹著生長(zhǎng)發(fā)育的各級(jí)卵母細(xì)胞構(gòu)成。卵母細(xì)胞發(fā)育到第3時(shí)相末，卵黃開(kāi)始在細(xì)胞核與細(xì)胞膜的中間部位積累，并圍繞細(xì)胞核呈環(huán)狀分布，隨后逐漸往細(xì)胞核和細(xì)胞膜兩邊擴(kuò)

6、散。卵黃的形成經(jīng)歷了卵黃顆粒前體、卵黃顆粒中間體和卵黃顆粒3個(gè)階段。在卵母細(xì)胞發(fā)育成熟過(guò)程中，核仁數(shù)目呈波浪狀起伏，到第3時(shí)相晚期達(dá)到最多，為118±26個(gè)，核仁顆粒在第2時(shí)相晚期達(dá)到最大，直徑為7.0±1.6μm。3細(xì)鱗裂腹魚(yú)人工繁殖研究精子在天然河水中快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間為43±8 s，壽命為180±36 s。精子在不同濃度的氯化鈉和葡萄糖溶液中快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間和壽命的變化規(guī)律基本一致。在0.6％的氯化鈉溶液和0.4％的葡萄糖溶液中精子的活力最

7、強(qiáng)，其精子快速運(yùn)動(dòng)的平均時(shí)間分別為54 s和52 s，平均壽命分別為1508s和1760s。加入去離子水后，停止運(yùn)動(dòng)的精子又可被激活。 2005～2006年，分別用4種不同的催產(chǎn)劑組合對(duì)經(jīng)人工馴養(yǎng)的180余尾性成熟的細(xì)鱗裂腹魚(yú)進(jìn)行了人工催產(chǎn)，共獲得受精卵50余萬(wàn)粒，孵化出仔魚(yú)9萬(wàn)余尾。可成功進(jìn)行人工催產(chǎn)的水溫范圍為13～18℃。選擇出催產(chǎn)效果較好的催產(chǎn)劑組合為：PG與HCG聯(lián)合二次注射，第一次注射劑量為(5mg+600IU)/k

8、g魚(yú)體重，第二次注射劑量為(12mg+1000IU)/kg魚(yú)體重，在水溫13～18℃效應(yīng)時(shí)間為85～98 h。 在水溫17±1℃的條件下，胚胎發(fā)育歷時(shí)124 h后孵出仔魚(yú)，孵出9d后仔魚(yú)鰾充氣并開(kāi)始平游。從受精卵到孵化出膜所需要的平均積溫為2108 h℃。胚胎發(fā)育可分為6個(gè)階段，共25個(gè)發(fā)育時(shí)期，各發(fā)育時(shí)期的特征均被描述。在裂腹魚(yú)亞科中，細(xì)鱗裂腹魚(yú)胚胎和仔魚(yú)發(fā)育速度較快，在肌肉效應(yīng)期以后更加明顯：心跳頻率并不是簡(jiǎn)單的由慢到快的線(xiàn)