促?；鞍准把a體C3與動脈粥樣硬化的相關性研究.pdf

1、背景:
　　動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是心腦血管疾病的重要病理基礎，它的形成是一個復雜的病理過程，涉及到多個病理反應，其特征性的病理過程為脂質代謝紊亂、血管內皮細胞受損、炎性細胞浸潤、斑塊破裂和血栓形成。代謝綜合征(metabolic syndrome，MS)和冠心病(coronary heart disease，CHD)是臨床上的常見疾病，二者均存在著不同程度的動脈硬化的發(fā)生。促?；鞍?Acylati

2、on stimulating protein，ASP)是1989年Cianflone等從人血漿中分離出的一種小分子量的蛋白質，是由脂肪細胞分泌的一種自分泌激素，由補體C3裂解而成，與補體C3a的一個生物學片段C3a desArg77為同一物質，C5L2是ASP的唯一功能性受體，ASP與C5L2受體結合后，通過增加二?；视娃D酰酶(Diacylglycerol acytransferase，DGAT)的活性及促進葡萄糖轉運體(glucos

3、etransporter，GLUT)從細胞內向細胞膜轉移，而影響著甘油三酯的合成以及葡萄糖的代謝。促?；鞍状x途徑功能失調將引起一系列脂質代謝紊亂，并認為與糖尿病、肥胖癥及心血管疾病密切相關，在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程中起到了一定的作用。
　　因此，本課題一方面通過研究ASP及補體C3與代謝綜合征患者動脈硬化指標(踝臂指數(shù)(ankle brachial index，ABI)、肱踝脈搏波傳導速度(brachial-ankle，b

4、aPWV)、頸動脈內中膜厚度(carotid intra-mediathickness，CIMT))的相關性來探討其是否參與動脈硬化的發(fā)生、發(fā)展;另一方面通過研究ASP、C5L2基因單核苷酸多態(tài)性及血清ASP、C3水平與冠心病的相關性來探討其是否為冠心病的易感基因及是否參與到冠心病的發(fā)病過程中，為動脈粥樣硬化的早期發(fā)現(xiàn)及早期干預治療提供新的思路。
　　第一部分 促?；鞍准把a體C3與代謝綜合征動脈硬化的相關性研究
　　目的：

5、
　　通過測定MS組和對照組血清ASP、C3的水平，分析ASP、C3與代謝綜合征患者動脈硬化指標baPWV、ABI、CIMT的相關性，探討ASP、C3與動脈粥樣硬化的關系。
　　方法：
　　選擇符合代謝綜合征(MS)診斷標準的患者76例為MS組，選擇同期門診查體志愿者（無高血壓、糖尿病、腹型肥胖、血脂紊亂、及其他炎癥、免疫性疾?。?2例作為對照組，所有入選對象均進行病史采集及體格檢查，測量收縮壓(SBP)、舒張壓(DB

6、P)、身高、體重、腰圍，計算體重指數(shù)(BMI)。用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清ASP水平，通過免疫比濁法測定血清補體C3水平，空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平的測定均由檢驗科進行。頸動脈內中膜厚度(CIMT)的測定采用體表超聲檢測，肱踝脈搏波傳導速度(baPWV)、踝臂指數(shù)(ABI)的測定采用BP-203RPEⅢ歐姆龍動脈硬化檢測裝置檢測。統(tǒng)計學處理

7、應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，計量資料以((x)±s)表示，兩組間計量資料的比較采用t檢驗;兩個變量間的相關性分析采用Pearson分析及偏回歸分析;多因素分析采用多因素logistic回歸分析。以P＜0.05作為統(tǒng)計學差異檢驗標準。
　　結果：
　　(1)MS組與對照組比較，年齡、性別組成無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，MS組腰圍，BMI，SBP，DBP，TC，LDL-C，TG，F(xiàn)BG高于對照組，存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05

8、)。
　　(2)MS組與對照組比較，MS組baPWV、CIMT高于對照組，ABI低于對照組，存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　(3)MS組與對照組比較，血清ASP、C3水平無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05);多因素回歸分析顯示ASP、C3與MS無明顯相關性(P＞0.05）。
　　(4)MS+AS組與MS-AS組比較，前者ASP、C3、SBP、FBG、LDL-C水平增高，HDL-C降低，存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05）;

9、baPWV異常組與正常組比較，SBP、FBG水平增高，存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05);ABI異常組與正常組比較，F(xiàn)BG、LDL-C水平增高，有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）;但baPWV、ABI正常與異常組比較，ASP、C3水平無統(tǒng)計學差異(p＞0.05)。
　　(5)雙變量相關性分析顯示血清ASP、C3水平與腰圍，BMI，F(xiàn)BG，TG存在明確相關性(p＜0.05），而與baPWV，ABI無顯著相關性;在排除腰圍、BMI等代謝因素以后

10、偏回歸分析顯示血清ASP、C3水平與CIMT呈獨立相關（P＜0.05）。
　　結論：
　　ASP、C3與MS患者動脈硬化指標CIMT存在相關性，在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展中起到了一定的作用。
　　第二部分 促?；鞍?、補體C3及受體C5L2與冠心病的相關性研究
　　目的：
　　(1)通過測定CHD組血清ASP、C3水平，探討ASP、C3與冠心病及冠脈嚴重程度的關系。
　　(2)通過檢測山東濟南地區(qū)、不同

11、種族CHD患者ASP301T＞C及受體C5L2698C＞T單核苷酸多態(tài)性，探討其與冠心病的關系。
　　方法：
　　選擇符合冠心病診斷標準的患者450例為冠心病組，其中漢族245例，回族205例，選擇同期查體志愿者500例為正常對照組，其中漢族250例，回族250例。所有研究對象均為山東濟南地區(qū)漢族、回族人群，無血緣關系。空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固

12、醇(LDL-C)水平均由檢驗科測定。采用TIANGEN RelaxGene Blood DNA System提取樣本基因組DNA，采用TaqMan探針技術進行基因分型。選擇其中行冠狀動脈造影確定冠狀動脈血管狹窄程度的冠心病患者62例，選擇對照組42例，對其進行病史采集及體格檢查，用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清ASP濃度，通過免疫比濁法測定補體C3濃度，同時通過western blot測定血清補體C3蛋白表達水平，通過定量RT-PCR測定血清補

13、體C3 mRNA的表達水平。
　　統(tǒng)計學處理應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，計量資料以((x)±s)表示，Hardy—Weinberg平衡檢驗群體代表性;連續(xù)變量間比較采用t檢驗或方差分析;兩個變量間的相關性分析采用Pearson分析;多因素分析采用多因素logistic回歸分析;兩組等位基因及基因型分布頻率比較采用x2檢驗;不同基因型間血脂、血糖比較采用協(xié)方差分析。以P＜0.05作為統(tǒng)計學差異檢驗標準。
　　結果：
　

14、　(1)CHD組與對照組比較，年齡、性別無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);CHD組SBP，DBP，TC，LDL-C，TG，F(xiàn)BG水平高于對照組，存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。
　　(2)CHD組與對照組比較，血清ASP，C3濃度明顯增高，存在顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。
　　(3)CHD組中冠狀動脈中、重度病變組血清ASP、C3濃度高于冠狀動脈無病變、輕度病變組，存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05);雙變量相關性分析顯示血清AS

15、P、C3水平與冠脈Gensini積分存在明確相關性（P＜0.05）。
　　(4)CHD組補體C3的蛋白表達及mRNA表達水平在冠狀動脈中、重度病變組高于無病變、輕度病變組，存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。
　　(5)多因素logistic回歸分析顯示血清ASP、C3與CHD存在相關性（P＜0.05）。
　　(6)Hardy—Weinberg平衡檢驗:ASP基因型分布在漢族組和回族組的x2值分別為0.875(P=0.38

16、)和0.087(P=0.75)，C5L2基因型分布在漢族組和回族組的x2值分別為0.863(P=0.37)和1.439(P=0.26)，符合Hardy-Weinberg平衡，具有群體代表性。
　　(7)山東濟南地區(qū)漢族人群中，C5L2基因的等位基因C、T及基因型CT的分布頻率在CHD組和對照組中存在統(tǒng)計學差異，CHD組CT基因型及等位基因T的分布頻率高于對照組。而在山東濟南地區(qū)回族人群中，CHD組ASP、C5L2基因的基因型及等位

17、基因的頻率分布均有差異，ASP CC基因型及等位基因C的頻率增高，C5L2基因型CT及T等位基因的頻率也高于對照組。
　　(8)山東濟南地區(qū)漢族、回族人群中，ASP基因CC基因型及C5L2基因的CT基因型組血糖升高，而各血脂結果未見異常。僅在回族人群中發(fā)現(xiàn)ASP CC基因型及C5L2 CT基因型組TG水平升高，而TC、HDL-C、LDL-C均無明顯統(tǒng)計學差異。
　　結論：
　　ASP、C3與冠脈嚴重程度存在相關性，可能