急性髓細(xì)胞白血病中miR-155、SHIP1及AKT的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、研究目的：
　　檢測(cè)急性髓細(xì)胞白血病(AML)患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞（BMMCs）中miR-155及SHIP1、AKT mRNA的表達(dá)，分析miR-155及SHIP1、AKT在急性髓細(xì)胞白血病患者中的臨床意義，初步探討miR-155及PI3K/AK T信號(hào)通路在AM L發(fā)病機(jī)理中的作用，為miR-155的靶點(diǎn)治療提供理論基礎(chǔ)。
　　研究方法：
　　1、收集急性髓細(xì)胞白血病患者骨髓標(biāo)本80例，其中初治組46例、緩解組34例；

2、對(duì)照組11例，為缺鐵性貧血患者。
　　2、采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法分別檢測(cè)AML患者骨髓標(biāo)本中miR-155和內(nèi)參基因U6及SHIP1、AKT和內(nèi)參基因GAPDH mRNA的表達(dá)水平。運(yùn)用相對(duì)定量法計(jì)算miR-155及SHIP1、AKT mRNA的相對(duì)表達(dá)量，計(jì)算公式如下：目的基因相對(duì)表達(dá)量=2-ΔCt×102。
　　3、應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料呈非正態(tài)分布，用中位數(shù)描述，采用Mann

3、-Whitney U檢驗(yàn)，相關(guān)性分析行Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)取α=0.05，選擇 p＜0.05為結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1、AML患者BMMCs中miR-155相對(duì)表達(dá)水平在初治組4.2931（2.1642～8.8388）及緩解組3.6853（2.3697～5.2406）均明顯高于對(duì)照組2.5190（0.9848～4.9360），P值分別為0.001和0.004，差異均具有

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；初治組miR-155的表達(dá)水平較緩解組也明顯增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.022）。
　　2、AML患者 BMMCs中miR-155相對(duì)表達(dá)水平在預(yù)后中等組4.3587（2.3519～8.8388）、不良組5.8910（3.2193～7.9801）均明顯高于預(yù)后良好組3.4706（2.1642～5.2193），P值分別為0.036、0.022，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；預(yù)后中等組與不良組

5、之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.174）。
　　3、按照34例初治患者miR-155的中位表達(dá)水平3.9656將患者分為高表達(dá)組（miR-155表達(dá)≥3.9656）與低表達(dá)組（miR-155表達(dá)＜3.9656），結(jié)果顯示高表達(dá)組與低表達(dá)組初次誘導(dǎo)緩解率分別為88.9％、56.3%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.636，P=0.031）；且化療后未完全緩解患者初治時(shí)的miR-155表達(dá)水平5.3700（2.9360～8.8388）明顯高

6、于化療后達(dá)完全緩解患者初治時(shí)的miR-155表達(dá)水平3.9012（2.1642～7.9801），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.005）。
　　4、AM L初治組中miR-155相對(duì)表達(dá)水平與患者的年齡、骨髓原始細(xì)胞比例、外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、外周血血紅蛋白計(jì)數(shù)、外周血血小板計(jì)數(shù)均無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05）。
　　5、AML患者 BMMCs中SHIP1mRNA相對(duì)表達(dá)水平在初治組為0.9083（0.0137～2.8756），緩解組

7、為1.8597（0.6848～4.2986），對(duì)照組為1.9740（0.3696～4.4502）；緩解組及對(duì)照組均明顯高于初治組，P值分別為0.002和0.005，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；緩解組與對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.510）。
　　6、AML患者BMMCs中AKT mRNA相對(duì)表達(dá)水平在AML初治組為4.5486（2.1105～8.2922）、緩解組為4.1122（1.6328～8.0067）、對(duì)照組

8、為4.2691（1.7854～6.4944），組間兩兩比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　7、初治組中miR-155與SHIP1 mRNA相對(duì)表達(dá)水平存在負(fù)相關(guān)（r=-0.354，p=0.016），SHIP1與 AKT mRNA相對(duì)表達(dá)水平也存在負(fù)相關(guān)（r=-0.398，p=0.006）；緩解組中miR-155與SHIP1 mRNA相對(duì)表達(dá)水平存在正相關(guān)（r=0.590，p=0.001），SHIP1與AKT mRNA相對(duì)

9、表達(dá)水平無(wú)明顯相關(guān)性（r=-0.216，p=0.270）；對(duì)照組中miR-155與 SHIP1 mRNA相對(duì)表達(dá)水平無(wú)明顯相關(guān)性（r=-0.145，p=0.670），SHIP1與AKT mRN A相對(duì)表達(dá)水平存在正相關(guān)（r=0.609，p=0.047）。
　　結(jié)論：
　　1、miR-155在AML患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中呈高表達(dá)，其表達(dá)水平與疾病狀態(tài)有關(guān)。
　　2、miR-155的表達(dá)水平與 AML預(yù)后相關(guān)，預(yù)后中等組及不

10、良組顯著高于預(yù)后良好組。miR-155表達(dá)水平與AML臨床療效密切相關(guān)，miR-155高表達(dá)組患者的緩解率較低。
　　3、miR-155與骨髓原始細(xì)胞比例，外周血白細(xì)胞、血紅蛋白和血小板計(jì)數(shù)以及年齡無(wú)明顯相關(guān)性。
　　4、SHIP1 mRNA在AML患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中呈低表達(dá)。AKT mRNA在AML患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中表達(dá)水平無(wú)明顯變化。
　　5、AML初治組中miR-155與 SHIP1mRNA表達(dá)及SHIP1m