膠東半島地區(qū)繡線菊屬植物種質(zhì)資源及RAPD分析研究.pdf

1、繡線菊屬（SpiraeaL.）植物為薔薇科落葉灌木，色、香、形俱佳，耐干旱、寒冷、瘠薄，具有極高的觀賞價(jià)值和園林應(yīng)用潛力。中國是繡線菊屬的現(xiàn)代分布和分化中心，種質(zhì)資源豐富。膠東半島位于我國東部沿海，自然環(huán)境獨(dú)特，植物區(qū)系成分復(fù)雜，有豐富的繡線菊屬植物資源分布，因其長(zhǎng)期處于天然自生狀態(tài)，具有寶貴的抗性基因。目前關(guān)于膠東半島地區(qū)繡線菊屬植物資源調(diào)查及遺傳育種方面的研究未見報(bào)道。
　　 本文對(duì)膠東半島地區(qū)繡線菊屬野生植物資源和栽培資源

2、進(jìn)行了詳細(xì)調(diào)查，并對(duì)17份繡線菊屬植物材料進(jìn)行了RAPD分析。主要結(jié)果如下:
　　 1.膠東半島地區(qū)野生繡線菊屬植物資源主要分布于嶗山、昆崳山、牙山、大澤山等山區(qū)，共有5個(gè)種，4個(gè)變種，分別為三椏繡線菊（S.trilobata）、華北繡線菊(S.fritschiana)、土莊繡線菊(S.pubescens)、疏毛繡線菊（S.hirsuta）、大葉華北繡線菊（S.fritschianavar.angulata）、小葉華北繡線菊（S

3、.fritschianavar.parvifolia）、三椏繡線菊毛葉變種(S.trilobatavar.pubescens)和粉花繡線菊光葉變種（S.japonicavar.fortunei）。
　　 2.膠東半島地區(qū)園林應(yīng)用的繡線菊屬植物主要見于青島、威海等地的公園、植物園和高校校園內(nèi)?？傮w應(yīng)用額度較低，數(shù)量較少，形式單一。常見有8個(gè)種、2個(gè)品種，其中以金山繡線菊(S.bumalda‘GoldMound’)、金焰繡線菊(S.

4、bumalda‘GoldFlame’）、粉花繡線菊（S.japonica）和珍珠繡線菊（S.thunbergii）4種應(yīng)用較多，常叢植于草坪供觀賞或群植做地被材料。另外麻葉繡線菊（S.cantoniensis）、李葉繡線菊（S.prunifolia）、菱葉繡線菊（S.vanhouttei）、中華繡線菊（S.chinensis）及繡球繡線菊（S.blumei）亦有少量栽培。
　　 3.采用改良CTAB法分別對(duì)17份繡線菊屬植物的冬

5、芽和嫩葉進(jìn)行總DNA提取，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，冬芽的DNA純度比嫩葉高，并達(dá)到了RAPD反應(yīng)的要求。采用單因素優(yōu)化對(duì)影響RAPD擴(kuò)增效果的因素進(jìn)行優(yōu)化，篩選出了最佳的20μl反應(yīng)體系和反應(yīng)程序:10×Taqbuffer2μl,Taq酶1.0U,0.15mmol/LdNTP,DNA2ng/μl,引物0.2μmol/L,Mg2+2.0mmol/L;94℃預(yù)變性4min，然后進(jìn)行40個(gè)循環(huán):94℃變性45s，37℃退火1min，72℃延伸1min，最后

6、72℃延伸5min，4℃終止反應(yīng)。
　　 4.利用最佳的反應(yīng)體系，從40條S系列隨機(jī)引物中篩選出22條擴(kuò)增效果好的引物應(yīng)用于17份材料;22條引物共檢測(cè)到371個(gè)位點(diǎn)，其中多態(tài)性位點(diǎn)335個(gè)，住點(diǎn)多態(tài)性比率為90.30％;遺傳距離的變異范圍在0.615-0.805之間;建立了17份繡線菊屬植物的親緣關(guān)系樹形結(jié)構(gòu)圖，UPGMA聚類結(jié)果在遺傳相似度0.676處，材料被分為三大類，說明RAPD技術(shù)在繡線菊屬植物種間劃分和鑒定上有很高的