拳參抗?jié)冃越Y(jié)腸炎有效部位制備工藝及其質(zhì)量控制方法的研究.pdf

1、本研究以蒙醫(yī)常用藥拳參為研究對象，觀察拳參不同洗脫部位對TNBS誘導小鼠結(jié)腸損傷的影響，篩選出拳參抗?jié)冃越Y(jié)腸炎的有效部位。建立了拳參抗?jié)冃越Y(jié)腸炎有效部位的制備工藝，并對其進行了質(zhì)量控制方法研究。
　　 1.通過文獻檢索，對潰瘍性結(jié)腸炎的治療現(xiàn)狀及拳參的化學成分、藥理作用和臨床應用進行了綜述。
　　 2.以昆明種小鼠為受試對象，利用TNBS誘導小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，對拳參不同的洗脫部位進行抗?jié)冃越Y(jié)腸炎篩選，通過對正常

2、對照組、模型組對照組、陽性(柳氮磺胺吡啶，SASP)對照組、80％乙醇提取物組、30％乙醇洗脫物組、60％乙醇洗脫物組、90％乙醇洗脫物組進行比較，以小鼠腹瀉、便血、體重變化、腸重指數(shù)、組織病理學的改變等為評價指標，確定60％乙醇洗脫部位為抗?jié)冃越Y(jié)腸炎有效部位。
　　 3.建立了拳參有效部位的制備方法。首先經(jīng)正交實驗考察優(yōu)化了拳參有效部位的提取工藝，以總黃烷及綠原酸含量為指標，確定最佳提取工藝：80％乙醇浸漬48小時后，用8倍

3、量80％乙醇以7 mL/min進行滲漉。然后利用大孔樹脂進行純化，以總黃烷及綠原酸含量為指標進行系統(tǒng)考察，結(jié)果A型大孔樹脂對有效部位中總黃烷及綠原酸富集率高，確定：洗脫溶劑為60％乙醇，上樣液pH3，上樣液濃度為0.3生藥g/mL，樹脂柱徑高比為1：7，吸附流速為2 BV/h，洗脫流速為2 BV/h，洗脫體積為3 BV。
　　 4.建立了有效部位的質(zhì)量控制方法。利用TLC及HPLC指紋圖譜對拳參有效部位進行定性分析。采用香草醛-

4、鹽酸比色法對拳參有效部位中總黃烷進行了含量測定，以兒茶素為對照品，實驗結(jié)果表明兒茶素在0.4～2.4 mg之間時線性關系良好，回歸方程為：y=0.2570x-0.002，r2=0.9996(n=5)。精密度、重復性、穩(wěn)定性實驗結(jié)果也均符合要求，測定有效部位總黃烷平均含量為62.6％，RSD為2.0％。采用HPLC法對拳參有效部位中綠原酸進行了含量測定，實驗結(jié)果表明綠原酸在0.408～4.08μg范圍時線性關系良好，y=5.6975×10