苦參堿抗大鼠局灶性缺血性腦損傷的作用及其保護(hù)星形膠質(zhì)細(xì)胞的機(jī)制.pdf

1、目的：研究苦參堿(Matrine)抗大鼠局灶性腦缺血的作用及其保護(hù)星形膠質(zhì)細(xì)胞的機(jī)制。 方法：采用線栓法建立大鼠永久性大腦中動(dòng)脈阻塞(permanentmiddlecerebralarteryocclusion，pMCAO)模型。大鼠腦缺血后10min靜脈注射Matrine，以腦梗塞體積、腦水腫及行為學(xué)癥狀等指標(biāo)評(píng)價(jià)Matrine對(duì)腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用。應(yīng)用相對(duì)腦血流(relativecerebralbloodflow，rCBF

2、)檢測(cè)觀察Matrine對(duì)pMCAO大鼠局部腦血流的影響。采用原代培養(yǎng)的新生大鼠皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧缺糖(oxygen-glucosedeprivation，OGD)方法，建立腦缺血的細(xì)胞模型。免疫熒光法分析NF-κB的核轉(zhuǎn)位及GFAP的表達(dá)。RealTimePCR測(cè)定OGD誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞p53mRNA的表達(dá)。LDH法檢測(cè)OGD誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞乳酸脫氫酶漏出率。 結(jié)果：Matrine(12.5-50mg/kg)可劑量依賴性

3、地改善pMCAO大鼠行為障礙，減小腦梗死體積和減輕腦水腫(P<0.05，P<0.01)。Matrine50mg/kg對(duì)pMCAO大鼠rCBF無(wú)明顯影響。Matrine(25-50mg/kg)組大鼠大腦皮層缺血區(qū)GFAP陽(yáng)性細(xì)胞明顯多于模型組(P<0.01)。OGD6h后，星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)明顯減少，Matrine(50-200μM)顯著增加星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)(P<0.05，P<0.01)。LDH結(jié)果顯示，OGD1h后星形膠質(zhì)細(xì)胞LDH的漏出率明

4、顯增加，以后逐漸增加，12h達(dá)高峰(P<0.05，P<0.01)；Matrine(50-200μM)能劑量依賴性地降低星形膠質(zhì)細(xì)胞OGD6h后LDH的漏出率(P<0.01)。免疫熒光結(jié)果表明：OGD3hNF-κB的核轉(zhuǎn)位顯著增加，6-12h達(dá)高峰(P<0.01)；Matrine可顯著抑制OGD6h誘導(dǎo)的NF-κB核轉(zhuǎn)位(P<0.05，P<0.01)。RealTimePCR結(jié)果顯示：與NF-κB核轉(zhuǎn)位的高峰時(shí)間相一致，OGD6h明顯誘導(dǎo)星