雄性黃顙魚與所保護(hù)子代的親緣關(guān)系分析.pdf

1、黃顙魚種類較多、分布廣泛，我國從珠江到黑龍江等水域均有分布，是一種小型的經(jīng)濟(jì)淡水魚類。雄性黃顙魚具有筑巢產(chǎn)卵保護(hù)子代的習(xí)性，通過這種習(xí)性來保證自己和雌性黃顙魚順利地進(jìn)行產(chǎn)卵受精以及自己后代的繁衍和生存。 利用磁珠富集法和放射性雜交相結(jié)合快速制備黃顙魚微衛(wèi)星。用限制性內(nèi)切酶MboI對(duì)黃顙魚完整基因組DNA酶切，蔗糖密度梯度離心收集400～900bp大小的片段，連接Brown接頭并用生物素標(biāo)記的(CA)16寡核苷酸探針與其雜交。雜交

2、復(fù)合物結(jié)合到包被有鏈霉親和素的磁珠上，洗脫，PCR擴(kuò)增，片段與pMD18-T載體相連，轉(zhuǎn)入CaC12制備的感受態(tài)大腸桿菌，克隆，構(gòu)建基因組文庫。經(jīng)同位γ-32P標(biāo)記的寡核苷酸探針(CA)16二次雜交篩選，獲得陽性克隆，選取適宜的微衛(wèi)星序列來設(shè)計(jì)引物，共設(shè)計(jì)了100對(duì)引物。 為了獲得更多有關(guān)遺傳學(xué)方面的信息，并加強(qiáng)對(duì)其生殖繁衍方面的理解，進(jìn)而闡明雄性黃顙魚是否具有保護(hù)自己子代的行為和是否存在一夫多妻的交配體制。本研究選取了12窩黃

3、顙魚受精卵，利用10對(duì)微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)黃顙魚的親本和受精卵進(jìn)行親權(quán)鑒定和黃顙魚子代的遺傳多樣性分析。 通過基因型x2檢驗(yàn)表明12窩黃顙魚子代在10個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)上都沒有偏離Hardy-Weinberg平衡。在單親鑒定中，累積非父排除概率為0.9986，平均父權(quán)相對(duì)機(jī)會(huì)(RCP)在99.989％～99.999％之間，每個(gè)子代在10個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)上的累積PI值在2006.73～604464.07之間。同時(shí)在鑒定分析中，發(fā)現(xiàn)少數(shù)窩里的卵子來自