進境臺灣十字花科蔬菜有害生物風險分析及番茄斑萎病毒快速檢測方法研究.pdf

1、隨著兩岸直接往來的日益頻繁和農(nóng)業(yè)合作的不斷深化，臺灣農(nóng)產(chǎn)品輸往大陸，即面臨不斷簡化查驗手續(xù)的需求，又面臨攜帶有害生物風險較高的情況，這些都對檢驗檢疫機構的把關、快檢快放和檢疫處理能力提出了更高要求。但由于歷史原因，對臺灣主要農(nóng)產(chǎn)品有害生物發(fā)生情況沒有進行過系統(tǒng)收集、調(diào)查和研究，無法展開風險預警及有害生物風險分析工作，使得日常檢疫工作具有盲目性；此外，由于口岸快速檢驗檢疫技術和檢疫處理技術的缺乏，使得快速通關和促進對臺貿(mào)易的良好愿望無法有

2、效實現(xiàn)。因此，提高對臺檢疫的預警、快速檢驗檢疫和檢疫處理能力勢在必行。本文主要對進境臺灣十字花科蔬菜進行風險分析并研究了臺灣有分布的重要檢疫性有害生物番茄斑萎病毒的快速檢測方法。 本文對進境的臺灣十字花科蔬菜有害生物的種類進行收集整理，確定臺灣十字花科蔬菜主要有害生物名單，共69種，其中昆蟲54種，真菌8種，細菌2種，病毒4種，線蟲1種；然后從有害生物在大陸地區(qū)分布情況、是否采取官方控制措施、進境植物及植物產(chǎn)品攜帶的可能性及該有

3、害生物的潛在的經(jīng)濟影響等方面，篩選出了進境臺灣十字花科蔬菜大陸關注的潛在檢疫性有害生物種類；采用定性分析的方法，對這些潛在檢疫性有害生物進行了進一步的風險評估，評價了其風險等級；最終確定了6種進境臺灣十字花科蔬菜大陸應關注的檢疫性有害生物(1種高風險、3種中風險及2種低風險)及2種非檢疫限定性有害生物名單。對本風險評估的不確定性也進行了簡要闡明。最后提出了有針對性的一些降低風險的管理措施。 番茄斑萎病毒(TSWV)在臺灣有分布，

4、本文應用免疫捕獲RT-PCR(IC\RT-PCR)方法來檢測TSWV，根據(jù)TSWV核衣殼(N)基因設計了引物，篩選出了一對TSWV特異性引物并優(yōu)化了反應條件。應用免疫捕獲技術來獲取的高質(zhì)量核酸進行反轉(zhuǎn)錄反應合成cDNA模板。使用篩選出的引物特異性擴增eDNA模板，可以擴增出一條230bp左右的條帶，與預期結果一致。產(chǎn)物測序結果經(jīng)過Blast發(fā)現(xiàn)與已發(fā)布的TSWV N基因序列(Ncbi數(shù)據(jù)庫編號X61799.1)同源性最高可達99％以上，