乙型肝炎病毒全長基因擴(kuò)增技術(shù)的建立及其在探討宮內(nèi)傳播機(jī)理中的初步應(yīng)用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:乙型肝炎病毒(HBV)基因組具有很高的變異性,許多HBV攜帶者個體內(nèi)都存在不同的HBV基因株(即多樣性或異質(zhì)性),不同株的病毒復(fù)制水平、免疫原性和傳播特點(diǎn)等均不同,對疾病的發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的影響也不同,為清晰的了解HBV基因在母嬰體內(nèi)異質(zhì)性的具體狀況,探索HBV基因變異與宮內(nèi)傳播的關(guān)系,該研究建立了乙型肝炎全長聚合酶鏈反應(yīng)(Full-length PCR),可以直接從血清中一次克隆HBV全基因,在此基礎(chǔ)上,對HBVsAg陽性孕婦及其新生

2、兒體內(nèi)HBV前S/S基因進(jìn)行了序列分析.結(jié)論:①HBV全長聚合酶鏈反應(yīng)目的產(chǎn)物帶清晰,重復(fù)性穩(wěn)定,所獲HBV全 長克隆經(jīng)PCR、酶切、測序三種方法鑒定,均證實(shí)為HBV全長克隆、表明HBV全長基因擴(kuò)增技術(shù)的建立是成功的,但這種方法更適用于對高拷貝模板的擴(kuò)增.②發(fā)生宮內(nèi)傳播的孕婦較未發(fā)生宮內(nèi)傳播的孕婦體內(nèi)HBV前S/S區(qū)基因異質(zhì)性高,堿基突變率亦顯著增高,說明孕婦體內(nèi)HBV基因異質(zhì)性增高可能較易發(fā)生宮內(nèi)傳播.③新生兒體內(nèi)HBV前S/S基因與

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