榅桲的組織培養(yǎng)快繁及耐鹽性研究.pdf

1、本研究以新疆蘋果型(木日皿)（木十字）為試材，研究了(木日皿)（木十字）的莖段及子葉組織培養(yǎng)快繁途徑，分別采用(木日皿)（木十字）組培苗和種子對其耐鹽性作了初步探討。組培快繁試驗(yàn)中分別研究了不同滅菌劑、滅菌時(shí)間、培養(yǎng)基、激素組合等對(木日皿)（木十字）外植體滅菌、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)的影響。耐鹽性研究中，探討了不同鹽種類、不同鹽濃度及不同鹽脅迫時(shí)間對(木日皿)（木十字）組培苗生長性狀、生理指標(biāo)的影響。同時(shí)也研究了上述鹽脅迫因素對

2、(木日皿)（木十字）種子萌發(fā)情況、酶活性和離子分布的影響。分析結(jié)果表明： 1)用(木日皿)（木十字）莖段進(jìn)行組培快繁研究中，0.1％升汞溶液消毒5min，滅菌效果最好；初代培養(yǎng)基以Ms+6-BA0.6mg/L效果較好，萌芽率和增殖倍數(shù)均較高，分別為93.3％和4.7；繼代培養(yǎng)基以MS+6-BA0.6mg/L+IBA0.2mg/L和Ms+6-BA0.6mg/L+IBA0.4mg/L組合交替使用更有利于組培苗的增殖和壯苗；生根培養(yǎng)基

3、以1/2MS(I)+NAA1.0mg/L生根率最高，達(dá)50％，平均根數(shù)為7-10根。短時(shí)間(7d)暗培養(yǎng)對誘導(dǎo)(木日皿)（木十字）苗生根有利，隨著暗培養(yǎng)天數(shù)的增加葉焦邊現(xiàn)象逐漸加重，甚至出現(xiàn)頂端枯死現(xiàn)象；6-BA對誘導(dǎo)(木日皿)（木十字）組培苗生根無益且易出現(xiàn)畸形葉。 2)在(木日皿)（木十字）成熟胚子葉不定植株再生研究中，1/4MS(I)+6-BA5mg/L+NAA0.5mg/L組合誘導(dǎo)成熟胚子葉芽分化效果最好，芽分化率可達(dá)7

4、7.5％；繼代培養(yǎng)基以MS+6一BA 0.6mg/L+IBA0.2mg/l。效果較好，增殖倍數(shù)約達(dá)4倍；生根培養(yǎng)基以速蘸IBA50mg/L 3s后接入活性炭培養(yǎng)基中生根率最高為75％，根數(shù)較多，但根生長緩慢，30d平均根長還不到1cm。移栽煉苗采用培養(yǎng)室培養(yǎng)缽煉苗法，以鋸末為介質(zhì)，15d左右長出新根，30d后成活率為78％。 3)組培苗耐鹽性研究中，萌芽率、增殖倍數(shù)、平均株高均隨著鹽濃度的增大而降低，膜透性和鹽害率隨著鹽濃度的增

5、大而升高。三種保護(hù)酶SOD、CAT、POD活性除POD活性隨著Na2SO4濃度的增加降低外，其它均隨著鹽濃度的增人呈先上升后下降趨勢。NaCl脅迫下葉綠素a、b和總?cè)~綠素含量的變化趨勢相同，均呈下降一升高一下降趨勢，但始終在空白處理時(shí)最高，最人鹽濃度時(shí)最低。Na2SO4脅迫下葉綠素a和總?cè)~綠素含量的變化趨勢相同，呈下降趨勢，葉綠素b與之不同，呈先升高后下降趨勢。類胡蘿卜素的含量變化沒有規(guī)律性。認(rèn)為，萌芽率、增殖倍數(shù)、平均株高、膜透性、鹽

6、害率、SOD、CAT、POD活性均可作為鑒定(木日皿)（木十字）耐鹽性評價(jià)指標(biāo)，葉綠素可作為抗鹽評價(jià)的參考指標(biāo)。兩種鹽脅迫下，(木日皿)（木十字）組培苗更能耐受NaCl脅迫，NaCl和Na2SO4分別在濃度為0.6％和0.8％時(shí)開始對(木日皿)（木十字）組培苗造成嚴(yán)重傷害，在0.8％和1.0％時(shí)至死率超過50％。 4)(木日皿)（木十字）種子耐鹽性研究中，隨著鹽濃度的增大，發(fā)芽率和成苗率均呈下降趨勢。NaCl脅迫時(shí)，SOD、CA

7、T活性均隨著鹽濃度的增人呈先上升后下降趨勢，POD；活性呈上升趨勢。Na2SO4脅迫時(shí)，隨著鹽濃度的增大POD、CAT活性呈先上升后下降趨勢，SOD活性呈降低趨勢。所以認(rèn)為，不同種類鹽脅迫下，(木日皿)（木十字）種子的耐鹽機(jī)制不同。隨著鹽濃度的增大，芽苗和培養(yǎng)基中的Na+均呈上升趨勢，種皮中的Na+呈先下降后上升趨勢。K在各組織中的變化沒有規(guī)律性。NaCl脅迫下，隨著鹽濃度的增加，芽苗和種皮中Na'/K'呈升高一降低趨勢，但始終高于空白

8、處理中Na'/K'的值，培養(yǎng)基中Na'/K'呈升高一降低一升高趨勢。Na2SO1脅迫時(shí)芽苗和種皮中Na+/K+呈升高-降低-升高趨勢，培養(yǎng)基中Na+/K+呈升高趨勢。綜合分析，發(fā)芽率、成茁率、SOD、CAT、POD、(木日皿)（木十字）芽苗中Na+含量可作為(木日皿)（木十字）種子耐鹽性評價(jià)指標(biāo)。K+、Na+/K+變化較復(fù)雜，能否作為(木日皿)（木十字）種子耐鹽性鑒定的指標(biāo)還有待于研究。Na2SO4脅迫對(木日皿)（木十字）種子發(fā)芽的影