復(fù)合免疫增強劑組方的篩選及其抗免疫應(yīng)激作用的研究.pdf

1、本研究通過淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗初步篩選出復(fù)合免疫增強劑的組方，然后通過飼養(yǎng)試驗測定斷奶仔豬的生長性能、血漿免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)，確定了一種復(fù)合免疫增強劑的組方，并應(yīng)用大腸桿菌脂多糖（LPS）應(yīng)激模型探討了該復(fù)合免疫增強劑對斷奶仔豬的血漿激素水平、炎性細(xì)胞因子水平及血漿免疫指標(biāo)的影響。本研究分為四個試驗： 試驗一復(fù)合免疫增強劑組方的體外篩選試驗為了篩選出免疫增強作用效果較好的中草藥提取物復(fù)合組方，將黃芪多糖（APS）、淫羊藿多糖（EP

2、S）、牛膝多糖（ABPS）和刺五加皂甙（ASS）按等質(zhì)量比組成四種不同的復(fù)方制劑，分別為APS+EPS、APS+ASS、APS+ABPS+EPS和APS+ABPS+ASS，用不含胎牛血清的RPMI-1640 培養(yǎng)液配制成50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL 和800μg/mL 五種不同濃度的溶液，分別加入到培養(yǎng)的仔豬外周血液淋巴細(xì)胞中，培養(yǎng)72 小時，用MTT 法測定淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)。結(jié)果表明：四種復(fù)方制

3、劑在適宜濃度下均能促進(jìn)ConA 或LPS 誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)，且復(fù)方制劑APS+ASS 和APS+ABPS+ASS 的效果較好。 試驗二復(fù)合免疫增強劑對斷奶仔豬生長性能、免疫功能及機體抗氧化功能的影響為比較復(fù)方A（APS+ASS）和復(fù)方B（APS+ABPS+ASS）兩種免疫增強劑的應(yīng)用效果，試驗選用來源相同、健康的平均體重為9.29±0.53kg、年齡為31±3d的大約克斷奶仔豬32頭，按體重隨機分為4個日糧處理，每個處理4

4、個重復(fù)（欄）每個重復(fù)（欄）2頭仔豬。四個日糧處理組分別為對照組（基礎(chǔ)日糧，不含抗生素）、黃芪多糖組（基礎(chǔ)日糧+0.05％黃芪多糖）、復(fù)方A組（基礎(chǔ)日糧+0.05％復(fù)方A免疫增強劑）和復(fù)方B組（基礎(chǔ)日糧+0.05％復(fù)方B免疫增強劑）。試驗仔豬用四種日糧飼喂，進(jìn)行為期14天的飼養(yǎng)試驗，測定仔豬的生長性能。試驗期末，對試驗豬進(jìn)行前腔靜脈采血，測定血漿常規(guī)生化指標(biāo)、免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)。結(jié)果表明：斷奶仔豬日糧中添加復(fù)方A免疫增強劑顯著提高了仔豬

5、的日增重（ADG），降低料重比（F/G）；顯著提高血漿γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）和一氧化氮合酶活性（NOS）以及血漿中免疫球蛋白（IgG）水平；顯著降低了血漿丙二醛（MDA）的含量。 試驗三復(fù)合免疫增強劑對斷奶仔豬免疫指標(biāo)、血漿激素及炎性細(xì)胞因子水平和常規(guī)生化指標(biāo)的影響為了研究復(fù)方A 免疫增強劑對斷奶仔豬免疫指標(biāo)、血漿激素及炎性細(xì)胞因子水平和常規(guī)生化指標(biāo)的影響，試驗選用來源一致、健康的平均體重為6.51±0.19kg、平均年齡為

6、23±3d 的杜洛克×長白×大白斷奶仔豬16 頭，按體重隨機分為2 個日糧處理，每個處理4 個重復(fù)（欄），每個重復(fù)（欄）2 頭仔豬。 兩個日糧處理組分別為對照組（基礎(chǔ)日糧，不含抗生素）和試驗組（基礎(chǔ)日糧+0.05％復(fù)方A 免疫增強劑）。用兩種日糧飼喂仔豬，進(jìn)行為期27d 的飼養(yǎng)試驗。 試驗第14d，從前腔靜脈采血測定血漿激素及炎性細(xì)胞因子水平、外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率等，同時對所有試驗豬只每千克體重耳后肌肉注射牛血清白蛋白（

7、BSA）1mg，于注射后第7d 采血測定血清BSA 抗體水平。試驗第21d 在仔豬左腿內(nèi)側(cè)距最后乳頭5cm 及距腹中線5cm處皮下注射植物血球凝集素（PHA）進(jìn)行皮膚過敏試驗。結(jié)果表明：斷奶仔豬日糧中添加復(fù)方A 免疫增強劑提高了植物血球凝集素（PHA）刺激的皮褶厚度增加值；降低了血漿生長抑素（SS）和胰高血糖素（PG）水平以及乳酸脫氫酶（LDH）的活性。 試驗四復(fù)合免疫增強劑對LPS 應(yīng)激斷奶仔豬生長性能、血漿激素及炎性細(xì)胞因子

8、水平和免疫指標(biāo)的影響試驗選用來源一致、健康的平均體重為6.51±0.19kg、平均年齡為23±3d 的杜洛克×長白×大白斷奶仔豬16 頭，按體重隨機分為2 個日糧處理，每個處理4個重復(fù)（欄），每個重復(fù)（欄）2 頭仔豬。兩個日糧處理組分別為對照組（基礎(chǔ)日糧，不含抗生素）和試驗組（基礎(chǔ)日糧+0.05％復(fù)方A 免疫增強劑）。分別用兩種日糧飼喂仔豬，進(jìn)行了為期27d 的飼養(yǎng)試驗。試驗第23d 對所有試驗豬只腹膜注射100μg/kgBW 的LPS