五味子有效成分的提取分離及制劑的研究.pdf

1、目的：確定五味子揮發(fā)油、木脂素類成分提取工藝路線；優(yōu)化提取工藝，富集含量，使提取物的有效部位和有效成分等可測(cè)成分含量達(dá)到50％以上；建立五味子藥材及其提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；研究酒制和醋制對(duì)五味子藥材及其提取物成分的影響；解決軟膠囊成型工藝和穩(wěn)定性問題。
　　方法：采用不同提取方法對(duì)比實(shí)驗(yàn)，選擇五味子提取的最佳工藝路線。利用最佳工藝超臨界二氧化碳流體萃取技術(shù)對(duì)五味子揮發(fā)油及木脂素類成分進(jìn)行提取，重點(diǎn)研究壓力、溫度、提取時(shí)間、二氧化碳流量

2、等工藝參數(shù)對(duì)提取率和提取物的影響。
　　采用薄層色譜法（TLC）鑒別五味子；采用紫外可見分光光度法（比色法），570nm波長，測(cè)定五味子木脂素含量；采用高效液相色譜法（HPLC），以甲醇-乙腈-水（1:1:1）為流動(dòng)相，250nm為檢測(cè)波長，測(cè)定五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素含量，建立五味子藥材及其提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　采用酒蒸4h，酒蒸2h，醋蒸5h，醋蒸3h等不同方法炮制五味子，采用薄層色譜法、紫外可見分光光度法和

3、高效液相色譜法，對(duì)其炮制品、生品和超臨界萃取物進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。
　　采用天然VE作為抗氧化劑，用于五味子軟膠囊，并且考察不同溫濕度等儲(chǔ)存條件對(duì)五味子軟膠囊的影響。
　　結(jié)果：以可測(cè)成分為指標(biāo)，以提高可測(cè)成分總含量為目標(biāo)，確定超臨界二氧化碳萃取最佳工藝參數(shù)為壓力10Pa，時(shí)間2 h，溫度42℃，流量40±5 Kg·h-1。
　　五味子提取物供試品色譜中，在與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同顏色的熒光斑點(diǎn)；五味子提

4、取物木脂素以五味子乙素計(jì)，在0.0055～0.0267mg·mL-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，平均回收率101.4%（RSD=2.5%）；五味子醇甲在0.275～1.375μg(r=0.9997)范圍內(nèi)、五味子甲素在0.125～0.625μg(r=0.9997)范圍內(nèi)、五味子乙素在0.160～0.800μg(r=0.9997)范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，平均回收率分別為97.9%（RSD=1.4%）、99.0%（RSD=1.9%）、98.2%（R

5、SD=1.9%）。
　　五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素在生品和酒蒸4h、酒蒸2h、醋蒸5h、醋蒸3h等炮制品中平均總含量分別為1.09%、1.22%、1.09%、1.10%和1.11%，與生品比較，各炮制品總含量分別提高了11.93%、0.00%、0.92%和1.83%；生品及各炮制品的超臨界萃取物，五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素和木脂素平均總含量分別為16.58%、22.59%、15.83%、16.99%和15.58%，

6、與生品超臨界萃取物比較，各炮制品總轉(zhuǎn)移率分別提高了66.10%、16.21%、26.85%和8.86%。
　　初步實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示，純五味子萃取物軟膠囊和五味子萃取物+VE混合物軟膠囊，可測(cè)成分含量變化不大；軟膠囊顏色均有不同程度的加深，后者比前者，顏色變化明顯稍輕。不同溫度濕度條件下的樣品，崩解時(shí)間有所不同，低溫低濕條件下的樣品，崩解時(shí)間較短，顏色變化最小。高溫高濕條件下的樣品，60min內(nèi)不崩解，顏色變化最大。
　　結(jié)論

7、：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方法簡便、準(zhǔn)確、快速，可對(duì)五味子提取物進(jìn)行有效的質(zhì)量控制。
　　酒蒸4h最有利于五味子有效成分的提出，可作為五味子藥材的最佳炮制工藝。
　　五味子經(jīng)酒制后（酒蒸4h），用優(yōu)化的超臨界二氧化碳萃取工藝參數(shù)，進(jìn)行五味子有效成分提取，所得萃取物可測(cè)成分總含量可達(dá)70%；工藝條件穩(wěn)定，重復(fù)性好；可達(dá)國家中藥5類新藥申報(bào)要求。
　　天然VE有利于五味子軟膠囊的儲(chǔ)存；低溫低濕條件有利于五味子軟膠囊的貯存，高溫高濕不利于五